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酶传感器 前言 食品的化学组成极为复杂,要在众多成分共存的情况下分析其中某一成分,常常需要繁杂的前处理过程。而生物传感器的问世,不仅使食品成分分析测定快速、低成本、高选择性成为可能,而且可以实现食品生产的在线质量控制,给人们带来了安全可靠及高质量的食品。 生物传感器 1. 定义 生物传感器是一类特殊的化学传感器,它是以生物活性单元(如酶、微生物、动植物组织、抗原等)作为生物敏感元件与适当的物理、化学信号换能器件组成的生物电化学分析系统。生物传感器具有特异识别的分子能力,以生物体内存在的活性物质为检测对象。 生物传感器传感原理 生物传感器 2. 结构 生物传感器的结构一般有两个主要组成部分: 其一是生物分子识别元件(感受器),是具有生物分子识别能力的核酸、有机物分子等;其二是信号转换器(换能器),主要有电化学电极(如电位、电流的测量)、光学检测元件、热敏电阻、场效应晶体管、压电石英晶体及表面等离子共振期间等。当待测物与分子识别元件特异性结合后,所产生的复合物(或光、热等)通过信号转换器转变为可以输出的电信号、光信号等,从而达到分析检测的目的。 The “classical” definition 识别元件 (a) Amperometric enzyme membrane electrode; (b) fiber optic enzyme sensor; (c) surface acoustic wave propagation sensor; (d) enzyme thermistor. 换能 方式 生物传感器 3. 分类 根据传感器输出信号的产生方式,可分为生物亲和型生物传感器、代谢型生物传感器和催化型生物传感器; 根据生物传感器中生物分子识别元件上的敏感物质可分为酶传感器、微生物传感器、组织传感器、基因传感器、免疫传感器; 根据生物传感器的信号转化器可分为电化学生物传感器、半导体生物传感器、量热型生物传感器、测光型生物传感器、测声型生物传感器。 生物传感器 4. 特点 与传统的化学传感器和离线分析技术(或质谱)相比,生物传感器具有如下特点: ①多样性,基于生物反应的特异性和多样性,从理论上讲可以制成测定所有生物物质的生物传感器; ②生物传感器以生物材料为分子识别元件,因此一般不需要样品的预处理,样品中被测组分的分离和检测同时完成,且测定时一般不需加入其他试剂; ③由于它的体积小,可以实现连续在线检测; ④响应快,样品用量少,且由于样品材料是固定化的,可以反复多次使用。 酶传感器 利用酶的催化作用制成的酶传感器是问世最早、成熟度最高的一类生物传感器。 酶传感器是应用固定化酶为敏感元件的生物传感器。根据信号转换器的类型,酶传感器大致可分为酶电极、酶场效应管传感器、酶热敏电阻传感器等。 酶传感器在食品工业中的应用 1. 葡萄糖酶电极在酶法生产葡萄糖工业中的应用 在双酶法生产葡萄糖的工业中,多数是采用斐林热滴定法测定还原糖的量来控制生产,该方法是以还原糖(葡萄糖及其他还原性糖)的量来反映葡萄糖的含量,不能准确地反映糖化过程中葡萄糖含量的变化,而且操作费时,无法准确、及时地指导生产。葡萄糖生物传感分析仪具有葡萄糖氧化酶的底物专一性、固定化酶的连续稳定性以及电化学的快速灵敏性等特性,应用于酶法生产葡萄糖过程中,可准确、快速、方便地测出水解液中的葡萄糖含量,及时了解双酶糖生产中淀粉的水解情况,准确判断水解终点,及时终止反应,提高葡萄糖的质量及产量。 酶传感器在食品工业中的应用 2. 用葡萄糖酶电极测定葡糖糖淀粉酶的活性 葡萄糖淀粉酶可连续地从淀粉和糖原的非还原末端除去葡萄糖单元,它水解淀粉得到的产物是β-葡萄糖, β-葡萄糖是葡萄糖氧化酶的专一性底物。糖化酶的使用和生产过程的监控中都需要进行酶活力的测定。传统的糖化酶活力测定方法是把底物可溶性淀粉和酶在特定的条件下保温后,用氧化还原滴定法或比色法测定产生的还原糖量确定葡萄糖酶的活性单位,不仅繁琐、费时,而且是把还原糖的生成量按葡萄糖计算,样品中的非葡萄糖还原性物质对测定结果有干扰,专一性差。 而用葡萄糖酶电极可以测定糖化酶的活力,以已知浓度的葡萄糖为标准,通过测定酶反应在单位时间内产生的葡萄糖量,就可以计算出糖化酶的活力单位。也可以利用基于葡萄糖酶电极设计的生物传感分析仪,用已知酶活力的糖化酶作标准,在仪器上直接显示酶活性单位,实现了糖化酶的快速测定。 酶传感器在食品工业中的应用 3. 氨基酸类的分析 氨基酸生产在发酵工业中占有重要地位,用于食品、保健品和医药,世界年销售额达数十亿美元。氨基酸测定常采用瓦勃呼吸法、色谱法、酶法等,这些方法或操作繁琐、费时,或精密度较差,而且不能满足在线分析的
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