有机物分离与纯化的方法、柱层析的一些技巧资料.pptVIP

7、一般薄层色谱实验操作 点样—展开—显色—计算Rf值 点样：在距薄板下沿1cm处的水平线上，毛细管口液滴与薄层表面相切，切忌玻璃管戳破薄层，可以重复点样。 展开：薄层板下沿水平插入层析缸，展开剂不能淹没样点，缸内充满展开剂蒸汽，要盖上盖子，展开剂水平线上升，接近薄层上沿时为止。 显色：大多物质要进行物理或者化学方法显色。 薄层板从层析缸取出，在展开剂前沿作一记号，待展开剂挥发干后显色。 物理方法：紫外灯照射；碘蒸汽熏蒸等。 化学方法：可以产生有色物质的反应。 8、影响Rf的因素 薄层厚度 吸附剂种类、活度、展开剂极性、展层的饱和度 展开方法：一般不加黏合剂，薄板水平展开。 单向上行一次展开，倾角70-80° Rf值接近的物质要多次单向展开。每次可用同一展开剂，也可不同的展开剂。 双向展开法：用正方形薄板，展开剂一次走到上沿后取出风干，旋转90°后再展开 边缘效应：溶剂前沿线一般朝下弯造成Rf不准，且使色斑大小及形状不规则 显色是配合薄层进行鉴别。 四、化学提纯法 化学净化法是使杂质与某种试剂发生化学反应除掉或者消除干扰。 有机化合物提取液干扰分析成分很大程度是脂肪与色素。 最常用的化学净化法是用酸处理对酸稳定的有机化合物或用碱处理对碱稳定的有机化合物来除杂。 1、酸净化：用浓H2SO4或浓H2SO4与发烟硫酸（1：1）混合液在分液漏斗中处理萃取液，可以除脂肪、色素。 浓硫酸