3动物DNA提取.ppt

将抽提得到的核蛋白用SDS（十二烷基磺酸钠）处理，DNA（RNA）与蛋白质分开，蛋白质变性沉淀。 酚-氯仿-异戊醇进一步将痕量蛋白质沉淀除去，则DNA溶解于溶液中。 向溶液中加入2倍体积无水乙醇或等体积异丙醇，DNA沉淀析出。 * * 实验:动物DNA提取 一、目的要求  学习和掌握从动物组织中提取DNA的原理和技术 二、实验原理  在稀氯化钠（0.14mol/L）溶液中，脱氧 核糖核蛋白溶解度(DNA)很小，核糖核蛋白(RNA)溶解度很大。 在浓氯化钠（1～2mol/L）溶液中，脱氧核糖核蛋白的溶解度很大，核糖核蛋白的溶解度很小。 因此，可利用不同浓度的氯化钠溶液，将脱氧核糖核蛋白和核糖核蛋白从样品中分别抽提出来。 三、器材及试剂 1．实验材料： ①新鲜猪肝（一次用不完一定要冷冻保存。提取动物组织DNA，一般选择细胞膜较脆弱，容易破碎的动物脏器，如胸腺、肝脏、脾脏、胰脏、精子等。） ②研钵 ③离心机 ④微量移液器 ⑤水浴锅 ⑥纱布 2．实验药剂： ①提取液（0.14mol/L NaCl，0.10mol/L EDTA） ②25%SDS ③5mol/L NaCl ④酚-氯仿-异戊醇混合液 ⑤ 3mol/L NaAC ⑥预冷的无水乙醇（异丙醇） 70%乙醇 TE缓冲液 *