翻译及其调控 详解.ppt

内质网(Endoplasmic Reticulum,ER) (1)粗面内质网 (RER) 表面附着大量核糖体，以扁囊为主，少数管状和泡状结构； 管腔与核膜腔相通，有的细胞中与核膜呈同心圆分布，围绕在核的周围 (2)滑面内质网 (SER) 膜面光滑，以分支小管和小泡相互交织形成网，与RER相通。 粗面内质网：参与蛋白质合成和蛋白质糖基化作用。 由附着于内质网膜上的核糖体合成的蛋白质进入内质网腔后转运。主要合成分泌性蛋白质(即外输性蛋白质),如蛋白类激素,消化酶原,抗体,胞外基质中的蛋白质等.RER的不同区域可以合成不同的蛋白质; 合成蛋白质的糖基化作用 糖基化作用是RER的主要功能之一，许多分泌蛋白膜、嵌如蛋白和溶酶体蛋白等都是糖蛋白，这些蛋白质的糖基化作用是在内质网内进行的。 蛋白质运输 蛋白质合成后被精确地运输到他们行使功能的部位，这个过程称为蛋白质的分选和运输，又可称为蛋白质靶向（protein targeting）。 胞浆中合成好的蛋白质去向：1）留在原地；2）分泌到细胞外；3）被转运到各类细胞器中。 膜被细胞器蛋白的三种输入机制：1）核孔转运；2）跨膜转运；3）小泡转运 分泌蛋白质的输送路径 胞吐到细胞外部 （连续分泌蛋白质） 胞吐到细胞外部 蛋白质 粗面内质网 输送小泡 高尔基体 分泌小泡 分泌储备小泡 （非连续分泌蛋白质） 折叠，初步糖基化 进一步糖基化 跨膜转运 芽生 融合 芽生 信号刺激 蛋白质运输的细胞学过程示意图 蛋白质的跨膜转运方式 信号肽引导的经内质网运输途径 ——信号肽假设 导肽引导的经线粒体等的运输途径 ——导肽假设 * 信号肽假设： 信号肽：位于分泌蛋白N端的一段肽段，长度一般为15-35个氨基酸残基, N-末端含有1个或多个带正电荷的氨基酸,其后是6-12个连续的疏水残基;在蛋白质合成中将核糖体引导到内质网,进入内质网后通常被切除； 信号序列没有特异性。 内含信号肽(internal signal peptides),位于肽链中部，具信号序列的作用，不能被切除, 合成的是膜蛋白。 信号肽假设的工作原理 信号识别颗粒(signal recognition partical, SRP),是一种核糖核酸蛋白复合体,沉降系数为11S，含有分子量为72kd、68kDa、54kDa、19kDa、14kDa及9kDa的6条多肽和一个7S(长约300个核苷酸)的scRNA, 它的作用是识别信号序列,并将核糖体引导到内质网上。 translation 协助信号肽插入内质网内膜 使核糖体肽链延伸反应暂时停止 SRP受体：又称停靠蛋白（docking protein，DP），能够与结合有信号序列的SRP牢牢地结合,使正在合成蛋白质的核糖体停靠到内质网上来 translation 核糖体受体蛋白－转运因子复合物： 形成跨膜通道，使信号肽和新生肽链通过；同时与核糖体紧密结合； translation 信号肽引导跨膜过程 信号肽与SRP结合→肽链延伸终止→SRP与受体结合→SRP脱离信号肽→肽链在内质网上继续合成，同时核糖体与跨膜通道蛋白结合→信号肽引导新生肽链进入内质网腔→信号肽切除→肽链延伸至终止→翻译体系解散 这种肽链边合成边向内质网腔转移的方式，是在翻译过程中完成的，即边翻译边跨膜，故称为共翻译（co-translation）。 从SRP受体上释放下来的SRP可以循环使用，称为SRP循环。 translation 导肽假设 线粒体、叶绿体、过氧化物体、乙醛酸体等的跨膜蛋白质是属于合成后再分选和运输的，这些蛋白质由胞浆内游离核糖体合成，由导肽牵引到靶向部位。 导肽位于蛋白质前体的N端，约含20~80个氨基酸残基，导肽所引导的前体蛋白通过细胞膜时，被1~2种内肽酶水解后转化为成熟型蛋白质。 导肽的特征：… … … … 在新生肽链的跨膜中，以及进入内质网以后，都需要保护其不发生错误的折叠和变性——分子伴侣负责调节蛋白质的折叠和组装。 translation 分子伴侣参与蛋白质的跨膜运输 分子伴侣(chaperone): 能与其它构象不稳定的蛋白相结合并使之稳定的一类蛋白质，通过与多肽结合来帮助被结合的多肽在体内的折叠、组装、转运或降解等，在完成任务后从多肽上释放下来。 translation 热休克蛋白（heat shock protein, hsp) 是一种分子伴侣,至少包括有两大类， hsp60和hsp70，前者帮助尚未折叠或错误折叠的多肽链形成正确的折叠，而后者可以和新生肽链结合，防止其聚集，有利于正确折叠的形成。 蛋白质经内质网进入高尔基体再加工和折叠 高尔基复合体是意大利科学家Camil