基因表达续信号肽序列.ppt

vv ●启动子（promotor） 能被RNA聚合酶（RNA polymerase）所识别并同RNA聚合酶特异性结合形成转录起始复合物，从而准确而有效地起始基因转录所需的一段核苷酸序列。通常位于转录起始位（+1位）上游（负区） 100bp（-100bp）范围内。 4. 中心法则及其发展 (1)中心法则的主要内容 ●遗传信息从DNA → DNA的复制过程。 ●遗传信息从DNA → mRNA → 蛋白质的转 录和翻译过程。 ●色氨酸的负调控机制 色氨酸阻遏蛋白在与色氨酸结合前，是无活性 的，只有当细胞存在色氨酸时，该阻遏蛋白与色氨 酸结合，其构型发生改变，使其处于活化状态，然 后结合到操纵基因上，从而阻止trp操纵子的转录。 3. 真核生物的基因表达调控 ●反式剪接: 反式剪接是以两个不同来源的RNA前体分子为底物，经过剪接，在成熟的mRNA 5′非翻译区拼接上一小段称为剪接前导序列（spliced learder，SL）或小外显子（mini-exon）的RNA片段。 ●弱化作用（attenuation） 在色氨酸操纵子中，阻遏蛋白解离前后，其转录效率相差大约70倍；而在阻遏状态下，trp酶系统的浓度却只有去阻遏状态下的1/700。为什么？人们发现，色氨酸操纵子还存在着另一个调控基因表达的系统，即衰减子（attenuator，又称衰减基因、弱化子、弱化基因）系统。 在色氨酸操纵子结构基因与操纵基因之间有一段长162个碱基的DNA序列，这段序列称为前导序列。它具有4个回文互补区——1区、2区、3区和4区，两个相邻的回文互补区能配对，可形成两种配对构型。 短肽 前导序列可翻译成一条14个氨基酸的短肽，所以它有核糖体结合位点。这条短肽序列的第10和11位置上，是两个连续的色氨酸密码子。在前导肽翻译过程中，核糖体在mRNA上停留时占据的位置，将决定哪一种二级结构可以形成，从而决定弱化子终止结构是否可以形成。 当有色氨酸时，可完整地翻译出短肽→核糖体停留在终止密码子处，邻近区段2位置→阻碍了2,3配对→使3, 4区段配对形成发夹结构终止子→RNA酶在弱化子处终止，不能向前移动。 1 2 3 4 色氨酸密码子 色氨酸密码子 终止密码子UGA 有色氨酸 核糖体 1 2 3 4 缺乏色氨酸，核糖体到达色氨酸密码子时→由于没有色氨酰tRNA的供应→停留在该密码子位置，位于区段1→使区段2与区段3配对→区段4无对应序列配对呈单链状态→RNA聚合酶顺利弱化子，继续向前移动，转录出完整的多顺反子序列。 1 2 3 4 色氨酸密码子 色氨酸密码子 终止密码子 缺乏色氨酸 核糖体 1 2 3 4 　 在细菌中，弱化作用是许多关键氨基酸生物合成所共有的一种调控机制；在苏氨酸、组氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸等操纵元的前导肽中均有弱化子存在，具有多个相应氨基酸密码子以供核糖体停留。 　 苏氨酸在前导肽中有8个苏氨酸密码子存在，组氨酸则有7个组氨酸密码子存在，核糖体停留在这些位置时，弱化子不产生发夹结构，结构基因开始转录。 (3)翻译水平的调控 ●翻译水平的自我调控（核糖体蛋白质合成的反馈（feedback regulation） A、产生调节蛋白的基因是被调节的靶基因。 B、只作用于自身的mRNA，属于自我限制系统。 大肠杆菌有7个操纵元与核糖体蛋白质合成有关。从这些操纵元转录而来的每一种mRNA，能够被同一操纵元内编码的核糖体蛋白质识别与结合。如果其中有一种核糖体蛋白质在细胞中过量积累，它们将与其自身的mRNA结合，阻止进一步翻译。 ●反义（antisense）RNA调控 反义RNA是指与mRNA互补的RNA分子, 也包括与其它RNA互补的RNA分子。由于核糖体不能翻译双链的RNA，所以反义RNA与mRNA特异性的互补结合, 即抑制了该mRNA的翻译。 近几年来通过人工合成反义RNA的基因，并将其导入细胞内转录成反义RNA，即能抑制某特定基因的表达，阻断该基因的功能, 有助于了解该基因对细胞生长和分化的作用。 (1)真核生物的基因表达调控的特点 ●活性染色体结构变化: 染色体相应区域发生某些结构和性质变化；转录区DNA有拓扑结构变化；DNA碱基修饰（如甲基化）变化及组蛋白变化。 ●正性调节占主导: RNA聚合酶对启动子的亲和力极小或根本没有实质性的亲和力，需依赖一种或多种激活蛋白的作用。 ●转录与翻译分隔进行: 转录与翻译在不同细胞部位进行。 ●转录后修饰、加工: 真