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  • 2016-12-06 发布于贵州
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Immunis protocol

免疫细胞化学技术的概述 *免疫细胞化学(immunocytochemistry, ICC) -是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定细胞内抗原的成分(主要是多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫细胞化学。 (一) 对抗原和抗体的要求 *具有特异性高和亲和力强的抗体是实验成功的首要条件。 -对抗体的要求:纯度高、比活性强; *高度特异性抗体的获得,取决于抗原的纯度。 -对抗原的要求:纯度高,免疫原性强,稳定无变化。 (二) 抗原 (antigen, Ag) *抗原的概念:凡是在机体内引起体液免疫和(或)细胞免疫反应的物质,称为抗原。抗原具有两个方面的特性: -免疫原性:引起机体产生抗体和(或)致敏淋细胞的特性; -免疫反应性:抗原能与相应的抗体及致敏淋巴细胞发生特异的结合或反应的特性。 *根据抗原是否显示免疫原性分为:完全抗原:分子量较大,一般在10kDa以上,并具有较复杂的化学组成。免疫原性最强的是蛋白质抗原,多糖次之;脂类和核酸必需和蛋白质及多糖形成复合物才具有良好的免疫原性 半抗原:又称为不完全抗原,分子量较小。例如:某些短肽、多糖、类脂和药物等。半抗原必需与载体结合,才能获得免疫原性。 载 体通常是具有高度免疫原性的大分子物质,具有将免疫原性传递给耦联的半抗原能力。 -常用的载体有钥孔

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