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- 2016-12-06 发布于湖北
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实验七脂肪酸的β-氧化
脂肪酸的β-氧化 一、目的了解脂肪酸的β-氧化作用。二、原理 在肝脏中,脂肪酸经β-氧化作用生成乙酰辅酶A 。2分子乙酰辅酶A可缩合生成乙酰乙酸。乙酰乙酸可脱羧生成丙酮,也可还原生成β-羟丁酸。乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮总称为酮体。 ?氧化的生化历程 酮体的生成—肝脏 本实验用新鲜肝糜与丁酸保温,生成的丙酮在碱性条件下,与碘生成碘仿。剩余的碘,可用标准硫代硫酸钠溶液滴定。 在碱性的条件下,丙酮与碘生成碘仿。反应式如下: 2NaOH+I2→NaIO+NaI+H2O CH3COCH3+3NaOI→CHI3+CH3COONa+2NaOH ??????????????????????????? 碘仿??????????????? 剩余的碘,可用标准硫代硫酸钠滴定。 NaOI+NaI+2HCl→I2+2NaCI+H2O I2+2Na2S2O3→Na2S4O6+2NaI 根据滴定样品与滴定对照所消耗的硫代硫酸钠之差,可以计算由丁酸氧化生成丙酮的量 1.肝糜制备 取新鲜肝脏,用0.9% 氯化钠溶液洗去污血。用滤纸吸去 表面的水分。称取肝组织5 g置研钵中。加少量0.9% 氯化钠 溶液,研磨成细浆。再加0.9% 氯化钠溶液至总体积为10 mL 。 2.取2个50 mL锥形瓶,各加入3 mL 1/15 mol/L pH 7.6的磷酸盐 缓冲液。向
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