果蝇精巢fasⅢ基因原核表达载体的构建
费紫薇,生命科学学院
摘 要:果蝇fasⅢ基因是蛋白编码类基因,在精巢中fasⅢ基因主要在hub cell中表达,本实验运用基因克隆技术,以PET28a质粒为载体,选用BamHI、HindⅢ两种酶做双酶切,将目的基因fasⅢ导入质粒载体PET28a,从而构建原核表达载体PET28a-fasⅢ,再将重组质粒转化到大肠杆菌TOP10中,实现fasⅢ基因的原核表达。实验所用质粒载体用卡那抗性(Kanr )标记,只有转化成功的大肠杆菌才能在涂有卡那霉素的LB培养基中生长。最终目的是实现fasⅢ蛋白的原核表达与纯化,为以后制备多克隆抗体奠定基础。
关键词:基因克隆;fasⅢ基因;原核表达载体;原核表达;
The construction of fas III prokaryotic expression vectors
ziweiFei,College of life science
Abstract: Drosophila Fas gene is protein coding gene in testis, mainly expressed in hub cell. In this experiment, by means of gene cloning technique, the target gene FasIII
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