第9章 重组DNA技术.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 探针来源 已克隆的基因片段 PCR、RT-PCR等方法扩增的基因片段 人工合成的DNA片段（寡核苷酸） 细胞中分离的RNA 分子杂交是基因芯片技术的基础。两条互补的核酸分子在一定条件下通过氢键作用而相互结合，形成双链DNA分子。当其中的一条核酸分子带有可检测的标记时，能形成特异性结合的分子就被检测出来 基因芯片中探针被有序地固定在固相支持物上，当基因芯片与带标记的待检测分子在一定条件下发生反应后，发生特异性结合的探针位置就被确定，根据探针分子的种类就可确定待测样品中是否含有某种特异的分子。在进行分子杂交前须对靶DNA分子进行扩增以提高反应的灵敏度，然后对靶DNA进行标记 样品的标记方法：荧光标记法、生物素标记法、同位素标记法等 * * 基因芯片杂交 基因芯片杂交后必须用扫读装置将芯片的反应结果转变为可供分析处理的图像数据，该扫读装置就是芯片扫描仪。目前商业化的芯片扫描仪有激光共聚焦芯片扫描仪、CCD芯片扫描仪等。在获得图像数据后借助计算机对结果进行分析和处理 对生物芯片扫描数据的采集、处理、分析和报告是生物芯片技术中的一个重要环节，它由复杂的计算机来完成。生物芯片是在一