基因重组技术生产胰岛素解剖.pptVIP

* S区的翻译产物为S多肽，由226个氨基酸残基组成；M多肽和L多肽（pre-S2-S和pre-S1-pre-S2-S)则分别由281个和389个氨基酸残基组成，Dane病毒颗粒除了含有大量的S多肽外，还有少量的M多肽和L多肽参与包装。 * 利用甲基营养菌巴斯德毕赤酵母作为受体细胞表达HBsAg，显示出比酿酒酵母系统更大的优越性。重组菌的构建过程如下：将HBsAgd 编码序列和用于选择标记的巴斯德毕赤酵母组氨醇脱氢酶基因PHIS4插入到甲醇可诱导型的AXO1启动子和AXO1终止子之间，构成环状重组质粒pBSAG151。用Bgl Ⅱ打开pBSAG151,使得AOX1启动子和AXO1终止子分别位于线型DNA片段的两端，并转化HIS ˉ的受体细胞。在HIS 的转化子中，重组DNA片段与受体染色体上的AOX1基因发生同源交换，单拷贝的HBsAg编码序列稳定地整合在染色体上。由于巴斯德毕赤酿酒酵母染色体DNA上还拥有表达水平较低的第二个乙醇氧化酶基因AOX2，因此转化子仍能在含有甲醇的培养基上生长。重组菌现在含有一定浓度的甘油培养基中培养，待甘油耗尽时，加入甲醇诱导HBsAg的表达，最终S蛋白的产量可达到受体细胞可溶性蛋白总量的2% ~3%，比含有多拷贝表达单元的重组酿酒酵母要高近一倍。 * * * 长期的植物生理学研究结果表明，植物对盐、碱、旱、寒、热等环境不利因素的自我调节能力很大程度上