酶的纯化和固定化.docVIP

分离纯化的意义:①从生物材料中分离制备蛋白质、核酸，研究其结构与功能，对于了解生命活动的规律，阐明生命现象的本质有重大意义。 ②工业生产的需要：食品、发酵、纺织、制革等工业，需要大量的高活性的酶制剂。如用淀粉酶制造葡萄糖、麦芽糖、糊精以及糖浆等。 ③医疗的需要：如用猪胰岛素治疗糖尿病。 ④基因工程的需要 酶活力：指酶催化反应的能力 1min催化1μmol分子底物转化的酶量为该酶的 一个活力单位(Unit)，采用最适条件 酶活力大小就是指在一定条件所催化的某一化学反应速度的快慢，即酶催化的反应速度越快，酶活力越高，反之则表示该酶活力低。 酶的总活力：指样品的全部酶活力 总活力=酶活力×总体积(ml) 或　　=酶活力×总质量(g) 总活力=活力单位数／ml酶液×总体积(m1) 比活力：指酶纯度指标 指单位蛋白质所含有的酶活力(Unit/mg蛋白) 比活力=活力单位数／mg蛋白(氮) =总活力单位数／总蛋白(氮)mg　 回收率(百分产量）：提纯后与提纯前酶的总活力之比 回收率=每次总活力/第一次总活力×100% ;提纯倍数：提纯后与提纯前比活力之比 提纯倍数=每次比活力/第一次比活力 基本原则：提取过程中避免酶变性而失去活性;防止强酸、强碱、高温和剧烈搅拌等； 要求在低温下操作;加入的化学试剂不使酶变性;操作中加入缓冲溶液. 抽提有效成分的影响因子: