3酶的定量(阅读).pptVIP

第三节 酶的定量 酶的定量 酶的定量并非对其蛋白质进行定量，而是对它的催化能力进行定量。 指酶催化一定化学反应的能力，通常用最适条件下酶所催化的化学反应的速度来衡量。? 酶促反应的速度越快，表示酶的活力越高；反之，则低。 所以，酶的定量就是测定酶的活力，也即测定酶促反应的速度。 一. 酶活力 酶的定量 不同的酶在不同的条件下反应速度曲线都不一样，但大致相似 二. 酶促反应速度的测定 以产物浓度对反应时间作图，可得到酶促反应速度曲线 产物 时间 0 酶的定量 二. 酶促反应速度的测定 可见，反应速度只在最初一段时间内保持恒定，随着时间的延长，反应速度逐渐下降 产物 时间 0 原 因 底物浓度的降低、产物的增加造成的逆反应的加快 产物的抑制作用 酶本身逐渐失活 酶的定量 二. 酶促反应速度的测定 斜率=浓度/时间=V 产物 时间 0 正确的酶促反应速度应该是在反应初期短时间内的反应速度，即反应初速度 酶的定量 二. 酶促反应速度的测定 测定酶的活力，就是测定酶促反应的初速度 所以 酶的定量 常用的酶活力单位有三种： 三. 酶活力的单位 1. 国际单位 (IU)? 这种单位是由国际酶学委员会规定的。 在标准条件(25℃、最适pH、最适底物浓度)下，酶每分钟催化 1umol 底物转化，这样的速度所代表的酶的活力即酶的量定义为1个国际单位 (IU)。 酶的定量 常用的酶活力单位有三种： 三. 酶活力的单位 2. Kat 是由国际酶学委员会于1972年规定的一种新单位。 在最适条件下，酶每秒钟催化1mol 底物转化，这样的速度所代表的酶的活力即酶的量定义为 1个Kat 。 1 Kat = 60×106 IU 酶的定量 常用的酶活力单位有三种： 三. 酶活力的单位 3. 自定义的活力单位 这种单位简单方便，省去了许多计算；但只能进行酶活力的相对比较。 酶习惯上或测定时使用的反应速度的单位定义为酶的活力单位。 有的甚至直接用测得的物理量，如单位时间内吸光值的变化 (DA/t) 表示酶活力单位。 酶的定量 四. 比活力 指每毫克蛋白所含的酶活力单位数 比活力是酶制剂纯度的常用指标 —— 比活力越大，表示酶越纯 比活力 ＝ 酶活力单位数（U） 蛋白质量（mg） 酶的定量