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- 2016-12-05 发布于湖北
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内容提要 1. PCR基因扩增仪的工作原理 PCR技术的原理及发展 PCR基因扩增仪的工作原理 2. PCR扩增仪的分类与结构 定性PCR扩增仪 实时荧光定量PCR扩增仪 3. PCR扩增仪的性能指标、操作规程及常见故障的排除 PCR扩增仪的性能指标 PCR扩增仪的操作规程 PCR扩增仪常见故障的排除 4. PCR扩增仪的应用 第一节 PCR基因扩增仪工作原理 一、PCR技术的历史发展及原理 聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种体外DNA扩增技术。在它发明以前,对于检测对象浓度非常低的标本,人们没有办法用常规方法测定。 1971年,Kleppe等人首次在文章中准确、客观地阐述了PCR方法。 1985年,美国PE-Cetus公司的Kary Mullis等人发明PCR技术。它推动了现代医学由细胞水平向分子水平、基因水平发展,是DNA测序的基础,它成为现代分子生物学发展过程中的一座里程碑。 PCR技术是在试管中(体外)给DNA的合成提供一种合适条件--模板DNA 、dNTP、寡核苷酸引物、DNA聚合酶、合适的缓冲体系,及让DNA变性、复性及延伸的温度和时间,使DNA能够体外复制。Mullis等因此项技术获得1993年诺贝尔奖。 PCR原理及其步骤:加热使双链DNA解开螺旋,在退火温度条件下加入的引物同模板DNA杂交,在Taq
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