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- 2016-12-09 发布于未知
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血清丙氨酸基转移酶测定
血清丙氨酸氨基转移酶测定 转移酶(transferases) 催化特定的基团从一种底物转移到另一种底物的酶。 反应代表式为: AB+C A+BC B为被转移的基团,如氨基(—NH2)等 转氨酶(transaminase) 又称氨基转移酶。 大多数转氨酶是催化α-氨基酸的氨基转移到α-酮酸的酮基上,产生另一种α-酮酸和α-氨基酸。 血清丙氨酸氨基转移酶测定(alanine aminotransferase, ALT) 测定方法: 定时比色法(两点法) 酶联-紫外连续监测法(动力学法或速率法) 酶联-紫外连续监测法 原理: L-丙氨酸+α-酮戊二酸 丙酮酸+L-谷氨酸 丙酮酸+NADH L-乳酸+NAD+ 在340nm连续监测NADH的消耗量,从而计算出ALT的活力。 方法学评价: 血清中也含有酮酸及LDH,可以消耗NADH而使测定结果偏高。 对策:采用过量的NADH(终浓度0.14~0.2mmol/L),将血清同不含α-酮戊二酸的所有试剂一起预温,使其他副反应充分进行,再加入α-酮戊二酸以启动酶反应,监测光吸收的变化,可完全排除这种干扰。 定时比色法 国内采用的比色测定法有三种: 赖氏法(30min) 金氏
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