Expression,purificationandidentificationofprotein课程.pptVIP

Expression , purification and identification of protein Xuexi Yang 1. Expression system In vitro ： in vitro protein synthesis system Prokaryotic Expression System - E. coli, B. subtilis In vivo yeast Eukaryotic Expression System insect cells mammalian cells 常用原核表达系统 例1.大肠杆菌中表达的融合有组氨酸标签的绿色荧光蛋白的分离纯化过程 选择实验材料： 大肠杆菌（含有重组质粒）在液体培养基中培养、离心、除去LB培养基，收集菌体沉淀 实验材料预处理 用蛋白质提取缓冲液悬浮菌体，离心后收集菌体沉淀，再洗涤一次，用少量缓冲液悬浮菌体，冰浴条件下超声破碎，离心后的上清即为蛋白提取液 蛋白