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质谱技术与生命科学的发展
《质谱技术与生命科学的发展》
姓名:xx
学号:xxxxxxxx
班级:xxxxxxxx
科目:仪器分析
任课老师:xxxxxxx
【摘要】
随着科学技术的进步,质谱得到了快速的发展,特别是与生物技术的结合,开创了质谱应用的新领域质谱已成为生命科学研究中非常重要的工具。其研究成果将大大富人类研究,并将使人类对生命的本质,其发生发展过程的认识达到一个前所未有的新高度
【关键词】
生物质谱 蛋白质 核酸 临床医学
【前言】
生命科学被誉为21世纪的最前沿科学之一,随着人类第一张基因序列草图的完成和发展,生命科学的研究也将进入一个崭新的后基因组学,即蛋白质组学时代。正如基因草图的提前绘制得益于大规模全自动毛细管测序技术一样,后基因组研究也将会借助于现代生物质谱技术等得到迅猛发展。20多年来生命科学的飞速发展,均得益于重大技术的突破。如果没有分子克隆、PCR(多聚酶链式反应)技术,我们今天就不可能取得在生物、医疗、药物领域的许多成就,例如人类基因组计划就有赖于分子克隆技术。任何一个时期科学的飞速发展都得益于相关技术的发展。一项技术对生命科学的促进作用可以持续相当一段时间,之后将产生另一重大技术并由它来领跑,而质谱技术就是今后一个时期内的“领跑技术”,将开启生命科学的崭新发展时代。质谱的开发历史要追溯到20世纪初J.J.Thomson创制的抛物线质谱装置,1919年Aston制成了第一台速度聚焦型质谱仪,成为了质谱发展史上的里程碑。从J.J. Thomson制成第一台质谱仪,到现在已有近90年了,早期的质谱仪主要是用来进行同位素测定和无机元素分析,随着离子光学理论的发展,质谱仪不断改进,其应用范围也在不断扩大二十世纪四十年代以后开始用于有机物分析,到20世纪50年代后期已广泛地应用于无机化合物和有机化合物的测定六十年代出现了气相色谱-质谱联用仪,使质谱仪的应用领域大大扩展,开始成为有机物分析的重要仪器。计算机的应用又使质谱分析法发生了飞跃变化,使其技术更加成熟,使用更加方便。八十年代以后又出现了一些新的质谱技术,如快原子轰击电离子源,基质辅助激光解吸电离源,电喷雾电离源,大气压化学电离源,以及随之而来的比较成熟的液相色谱-质谱联用仪,感应耦合等离子体质谱仪,富立叶变换质谱仪等。这些新的电离技术和新的质谱仪使质谱分析又取得了长足进展。质谱技术在生命科学领域的应用,更为质谱的发展注入了新的活力,形成了独特的生物质谱技术。质谱分析法2002年诺贝尔化学奖表彰的两项成果之一是通过对被测样品离子的质荷比的测定来进行分析的一种分析方法。被分析的样品首先要离子化,然后利用不同离子在电场或磁场的运动行为的不同,把离子按质荷比(m/z)分开而得到质谱,通过样品的质谱和相关信息,可以得到样品的定性定量结果。 生物质谱技术????电喷雾质谱技术和基质辅助激光解吸附质谱技术是诞生于80年代末期的两项轨电离技术。这两项技术的出现使传统的主要用于小分子物质研究的质谱技术发生了革命性的变革。它们具有高灵敏度和高质量检测范围,使得在pmol(10-12甚至fmol(10-15的水平上准确地分析分子量高达几万到几十万的生物大分子成为可能,从而使质谱技术真正走入了生命科学的研究领域,并得到迅速的发展。以下主要介绍与生物医学有关的几项质谱技术。
电喷雾质谱技术(Electrospray Ionizsation MassSpectrometry,ESI-MS)
??? 电喷雾质谱技术是在毛细管的出口处施加一高电压,所产生的高电场使从毛细管流出的液体雾化成细小的带电液滴,随着溶剂蒸发,液滴表面的电荷强度逐渐增大,最后液滴崩解为大量带一个或多个电荷的离子,致使分析物以单电荷或多电荷离子的形式进入气相。电喷雾离子化的特点是产生高电荷离子而不是碎片离子,使质量电荷比(m/z)降低到多数质量分析仪器都可以检测的范围,因而大大扩展了分子量的分析范围,离子的真实分子质量也可以根据质荷比及电行数算出。
????电喷雾质谱的优势就是它可以方便地与多种分离技术联合使用,如液一质联用(LC-MS)是将液相色谱与质谱联合而达到检测大分子物质的目的。
基质辅助激光解吸附质谱技术
??(MatriX AssistedLaser Desorption /Ionization,MALDI)基本原理是将分析物分散在基质分子中并形成晶体,当用激光照射晶体时,由于基质分子经辐射所吸收的能量,导致能量蓄积并迅速产热,从而使基质晶体升华,致使基质和分析物膨胀并进入气相。MALDAI所产生的质谱图多为单电荷离子,因而质谱图中的离子与多肽和蛋白质的质量有—一对应关系。
??? MALDI产生的离子常用飞行时间(Time-of-Flight,TOF)检测器来检测,理论上讲,只要飞行管的长度
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