生物技术制药期末复习提纲.doc

生物技术制药复习提纲 生物技术所含的主要技术范畴包含有哪几个工程？ 基因工程； 细胞工程 ；酶工程 ； 发酵工程 ； 蛋白质核酸工程 和 生化工程 ； 基因工程菌在传代过程中的质粒不稳定的现象主要是指哪两种不稳定？ 质粒不稳定分为 分裂不稳定性 和 结构不稳定性 基因工程菌的培养方式有哪几种？ 分批培养 ； 补料分批培养 ； 连续培养 ； 透析培养 和 固定化培养 ； 从生产实际看，动物细胞的大规模培养主要可以分为哪几种？ 悬浮培养、 贴壁培养 和 贴壁-悬浮培养。 动物细胞培养基分为哪三类？ 天然培养基 合成培养基 无血清培养基 植物组织和细胞培养所用培养基种类较多，但通常都含有哪几类？。 无机盐 碳源 植物生长调节剂 有机氮源 维生素 在V区中，决定抗体分子与抗原分子发生特异性结合的关键部位称为互补决定区（CDR） ，而 c 区则决定了Ig分子的异种抗原性。 酶固定法中的包埋法可分为哪两种？ 网格型 微囊型 发酵工业的生产水平取决于哪三个要素？ 生产菌种 、 发酵工艺 和 发酵设备 生物药物广泛应用于医学各领域，按功能用途可分为哪三类？ 治疗药物 、 、 生理活性物质 生物技术药物 一般说来，采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物称为生物技术药物。 基因表达 基因表达是指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所有加工过程。 质粒的分裂不稳定 通常将质粒不稳定性分为两类:一类是结构不稳定性,也就是质粒由于碱基突变、缺失、插入等引起的遗传信息变化;另一类是分裂不稳定性,指在细胞分裂过程中质粒不能分配到子代细胞中,从而使部分子代细胞不带质粒(即P-细胞)。在连续和分批培养过程中均能观察到此两类现象发生。一般情况下具有质粒的细胞(即P＋细胞)需要合成较多的DNA、RNA和蛋白质,因此其比生长速率低于P-细胞,从而P-细胞一旦形成能较快速地生长繁殖并占据培养物中的大多数。 人-鼠嵌合抗体 嵌合抗体是最早制备成功的基因工程抗体。它是由鼠源性抗体的 V 区基因与人抗体的 C 区基因拼接为嵌合基因，然后插入载体，转染骨髓瘤组织表达的抗体分子。因其减少了鼠源成分，从而降低了鼠源性抗体引起的不良反应，并有助于提高疗效。 次级代谢产物 次级代谢产物是指生物生长到一定阶段后通过次级代谢合成的分子结构十分复杂、对该生物无明显生理功能，或并非是该生物生长和繁殖所必需的小分子物质 透析膜包裹，并使外部有新鲜培养液流动着的一种培养方法 单克隆抗体过程中，用骨髓瘤细胞和B细胞融合而成的细胞。 离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。 目的基因与载体结合构建重组体重组体导入宿主细胞重组体的筛选、鉴定和分析目的基因的表达 用抗原免疫小鼠 骨髓瘤细胞的培养 免疫脾细胞 骨髓瘤细胞 在PEG作用下合成杂交瘤细胞 选择培养基（融合的细胞死亡，杂交瘤细胞存活） 阳性克隆的筛选机克隆化 克隆扩增及大量制备McAb 简述固定化酶生产药物的优点和缺点 固定化酶生产药物的优点： 可以多次使用，酶的稳定性提高； 反应后，酶与底物和产物易于分开，产物中无残留酶，易于纯化； 反应条件易于控制，可实现转化反应的连续化和自动控制； 酶的利用率高，单位酶催化的底物量增加，用酶量少。 缺点： 固定化过程中，可能会引起酶活性丧失； 只适用于催化可溶性小分子底物的酶促反应，对大分子底物不适合； （3）通常不适用于多酶反应，尤其是需要辅助因子参与的反应。 分离纯化基因工程药物常用的色谱方法有那些？它们的原理是什么？ 分离纯化基因工程药物常用的色谱方法有：离子交换色谱，疏水色谱，亲和色谱和凝胶过滤色谱； 离子交换色谱，以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子和交换剂上的平衡离子进行可拟交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种色谱方法； 疏水色谱，利用蛋白质表面的疏水区域与固定相上疏水性基团相互作用力的差异对蛋白质组分进行分离的色谱方法； 亲和色谱：利用固定化配体与目的蛋白质之间非常特异的生物亲和力进行吸附，这种结合既是特异的又是可逆的，改变条件可以使这种结合解除的原理分离纯化蛋白质； 凝胶过滤色谱，是以多孔性凝胶填料为固定相，按分子大小对溶液中各组分进行分离的液相色谱方法。 简述生物技术制药的基本