分子生物学实验28631课件.pptVIP

* Content Layouts * Content Layouts * Content Layouts L/O/G/O KeyGEN分子生物学实验技术 2012-11-21 Contents 核酸提取纯化 PCR/RT-PCR Realtime PCR 凯基产品 4 1 2 3 基因工程 基因工程是在分子水平上，用人工方法提取或制备DNA，在体外切割、拼接和重新组合，然后通过载体把重组的DNA分子导入受体细胞，使外源DNA在受体细胞中进行复制与表达，产生出人们所需要的产物，或定向创造生物新性状，并使之稳定地传给下一代。 目的 ①分离获得某一感兴趣的基因或DNA 序列 ②获得感兴趣基因的表达产物（蛋白质） 基因工程的基本过程 分 切 接 转 筛 表 RNA提取、 RT-PCR 、 PCR 内切酶 DNA 连接酶 质粒提取、脂质体 抗性筛选、 GFP 、药物筛选 蛋白纯化 载体——质粒 什么是质粒？ 质粒是染色体外的稳定遗传因子 双链、闭合、超螺旋DNA 主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中 自主复制和转录，并表达所携带的遗传信息 质粒提取—碱裂解法 碱裂解法原理 1 2 3 染色体DNA比质粒DNA分子大得多，且染色体DNA为线状分子，而质粒DNA为共价闭合环状分子 变性染色体DNA片段与蛋白质形成沉淀，而复性的超螺旋质粒DN