双扩凝集反应讲课.pptVIP

沉淀反应与凝集反应 原理 用半固体琼脂凝胶作为介质，可溶性抗原、抗体在其中能自由扩散。将可溶性抗原和抗体分别加入琼脂板上相对应的孔中，两者各自向四周扩散，如果抗原和抗体相对应，则在两者比例适当处形成白色沉淀线。 主要材料 器材：载玻片、EP管、微量加样器、枪头、打孔器、 试剂：PBS、琼脂粉、 Ag（正常小鼠IgG）、 Ab（兔抗小鼠IgG血清）  步骤 配制1%琼脂-制板-打孔 稀释抗体：取4支EP管，将抗体倍比稀释 加样：1~5:抗体，中间孔抗原(10μL) 琼脂板放入湿盒内，置4℃，24-48小时后观察结果。 应用: 测定抗体的效价(稀释倍数倒数) 用特异性抗体检测抗原 检查抗原和免疫血清的特异性、纯度或浓度，比较抗原之间的异同点 原理 颗粒性抗原(完整的病原微生物或红细胞等)与相应抗体特异性结合，在有电解质存在的条件下，形成肉眼可见的凝集块。 基本类型 直接凝集反应、间接凝集反应、凝集抑制反应等。 主要材料 器材：酒精棉球、灭菌干棉球、微量加样器、 灭菌枪头、玻片、一次性采血针 试剂 抗A试剂（蓝色）、抗B试剂（黄色） 1．取洁净载玻片1块，并标记（如图） 2．将抗A、B抗体分别加1滴于玻片两侧。 3．毛细血管采血法: 酒精棉消毒被检