REACH法规第四卷译稿26.docVIP

B.26. 啮齿动物口饲毒性物质90天的慢性毒性研究 研究重复的剂量 90天的老鼠的口腔毒性 1. 测定方法 这种极慢性口腔毒性测定的测定方法与OECD TG 408（1998）类似。 1.1. 引言 在化学药品的毒性评估和分析中，关键在于重复实验，获得持续进行到重复的剂量 28 天后的精确的毒性物质测定。90 天的研究意义在于提供可能的健康问题或重复出现的危险。较长的持续时间包含了断奶期、 生长期和成熟期。研究将会提供关于主要的毒性物质的效应,指出作用靶器官和毒性积聚的可能性, 而且能提供没有相反现象产生的，一个大致作用可能被用于为慢性研究选择剂量水平的参照。并能为人类的安全标准提供参照。 该测定方法特别强调了神经末端和免疫系统的反应和对生殖功能的影响。必须严格客观地分析以获得尽可能多的信息。这可用来研究可毒害神经系统、免疫器官或生殖器官的化学物质的特性并保证进一步深入研究的进行。 也见前言部份 B 。 1.2. 定义 剂量: 是提供测定物质的数量。 剂量用重量 (g,毫克) 或当做 测定动物样品的每单位重量测定物质的重量 (例如,毫克/公斤), 或一定的浓度 (百万分之一)来表示。 药量: 一个一般的术语是包含的剂量，使用的频率和持续用药的时间。 NOAEL: 是缩写为没有相反现象出现的最高的剂量水平。 1.3. 测定的测定方法原则 将不同剂量测定物分别施与几个实验组，一个剂量水平用于一个组，共工用90天。在此期间仔细观察动物中毒的症状。若有死亡，则解剖分析，并且，在实验结束要将所有动物样品进行解剖分析。 1.4. 对测定方法描述 准备动物 所选用的动物必须在实验室条件下适应了5天，并且没有经历过之前的实验。被测定的动物需注意其品种，血缘，来源，性别，重量和（或）年龄。动物需被随意地分配到各个对照组饲养组。排放关养动物样品的笼子时，应使其影响减小到最小。每个动物都应当被编上特定的号码。 准备药剂 被测药剂通过食物或饮水来强饲。其分配测定方法因实验目的和被测药品数量而定。 如果可能的话，被测药品应当被溶解或悬浮在赋形剂中。只要可能务必用水做溶剂或乳剂，其次可选油类（如玉米油），再次才考虑其他的赋形剂。除水以外，其他赋形剂都要考虑其毒性。同时，药品在被测条件下的稳定性也应当考虑到。 测定条件 动物样品 最佳的物种是鼠类，尽管其他啮齿动物，如小鼠，有时也被使用。实验室里常用一些年轻，健康的成熟动物。雌性动物必须是没有生产或未怀孕的。药品应当在动物尚未断奶，且还没有九个月大时开始施加。在实验的开始阶段，同性动物之间的体重相差应当尽可能的小，个体之间相差不得超过20%。如果实验要求做初试和长期的毒性研究，那么同一来源，同一血缘的动物都应当进行这两项研究。 数量和性别 同一药量水平至少要有20只动物（10雄，10雌）。如果过渡时期计划杀死动物，那么这一数目应随实验之前计划杀死动物样品的数目而增加。根据已有的化学知识和类似实验的经验，实验之后，应当考虑增加一个附加的实验组，这个实验组应当有十只动物（每种性别5只）且施以最高剂量，以便观察，从而确定毒性是持久的还是可以消除的。这个观察期的持续时间应当根据观察作用而适当选择。 药剂量 至少要分三个档次，并且同时进行，除非进行的是有限制的测定（见1.4.3.4）。药剂的量的确定依据是研究中发现的重复出现的剂量，并且要考虑到被测药品及其相关物质现有的毒理学和毒物学实验数据。除非受被测物质物化性质和生物效应的影响，否则，最高测定药量应当能够中毒，而不会致死或引起严重后果。递减的剂量应当是能够观察到减少剂量的作用的最少量。两到四个间隔递减最佳，四个间隔时常有较大的间隔用量（如，多于6-10个最小量）。 应当有一个对照组，该组不施以任何药剂，如果实验中加了赋形剂，那么该组就只施加赋形剂。除了不强饲药品以外，该组的动物与其他组的动物一样饲养。如果使用了赋形剂，那么其量应当用最大量。如果被测药品是通过食物强饲的，那么将因此减少食物摄入，这时最好使用两个对照组，以此辨别食物减少和药品减少而带来得损失。 应当考虑到赋形剂和其他添加剂的一些性质，如：对吸收，分配，新陈代谢，或药品的持久性的影响；被测药品中的化学物质是否会改变毒性；是否会影响食物和水分的吸收或影响动物样品的营养状况。 极限测定 如果在相当于每天每千克体重吸收1000毫克的剂量水平上，按照实验中所描述的过程操作，没有观察到可见的影响，且对药品结构进行分析也不会产生毒性，那么就没有必要进行完整的实验操作。如果实验者认为没有必要进行更高剂量的实验，那就可以极限测定。 1.5. 程序 施加药剂 动物们应当每周服药七天，持续90天。其他的服药测定方法，如每周五天，在选用时应当考虑其是否合理。如果是通过强饲来施加药物的，那么往往要采用胃管或合适的插管。液体