高考生物 专题5 DNA和蛋白质技术基础复习 新人教版选修1.docVIP

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  • 2016-12-12 发布于湖北
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高考生物 专题5 DNA和蛋白质技术基础复习 新人教版选修1.doc

专题5 DNA和蛋白质技术 【高考新动向】 1、蛋白质的提取和分离 2、PCR技术的基本操作和应用 【考纲全景透析】 一、DNA的粗提取与鉴定 1、实验原理:(1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。 (2)DNA不溶于酒精溶液。 (3)DNA不被蛋白酶所水解。 (4)DNA在沸水浴条件下可被二苯胺染成蓝色。 2.DNA与蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度不同 3.DNA的析出与鉴定 (1)析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液等体积的冷却酒精溶液(体积分数为95%)静置2~3 min,溶液中会出现白色丝状物(此即粗提取的DNA),用玻璃棒沿一个方向搅拌卷起丝状物。 (2)鉴定 二、多聚酶链式反应扩增DNA片段 1、PCR:多聚酶链式反应的简称,是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。 原理:DNA的热变性 2、PCR反应过程 (1)变性:当温度上升到90℃以上时,双链DNA解聚为单链 (2)复性:温度下降到50℃左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合 (3)延伸:温度上升到72℃左右时,溶液中的4种脱氧核苷酸(A,T,C,G)在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 3、PCR结果:DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列,使这段固定长度的序列呈指数扩增。 三、血

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