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小麦根部内生细菌的分离及其作用研究（居中，黑体3号，段前段后2行行距） 王 兵（宋体小4号） （生命科学学院2007级生物工程专业 开封 475004）（宋体5号） 摘 要：（楷体小4号加粗）通过常规表面消毒法，从取自不同地区的健康小麦根中分离出222株内生细菌．通用……WK-1-9同时有助于小麦抗盐和碱。（内容用宋体5号，1.5倍行距） 关键词：（楷体小4号加粗）小麦；内生细菌；分离；盐碱；拮抗作用 （宋体5号） 1 前言（黑体3号，段前段后1行行距） 1.1内生菌的由来（黑体小3号，段前段后0.5行行距） 植物内生细菌是能够定殖在植物细胞间隙或细胞内，并与寄主植物建立和谐联合关系的一类微生物[1] （参考文献序号采用右上角标注）。（正文内容--宋体小四号字体 1.5倍行距） 1.2内生菌的进展及现状 （黑体小3号，段前段后0.5行行距） 对植物内生细菌的研究工作早已开始。Allen E.K., Burick.E.等人认为植物组织内部………… 1.3内生菌对植物的益生作用 尽管内生菌在植物体中的生物量似乎微不足道，但现有研究认为内生菌可通过自身…… 1.3.1促进宿主植物生长（黑体4号，段前段后0.5行行距） 感染内生菌的植物一般具有比未感染植株生长快速的特点。内生菌的这种促植物生……也有所提高。 1.3.2增加宿主对环境胁迫的抗性（黑体4号，段前段后0.5行行距） 2 材料与方法 （黑体3号，段前段后1行行距） 2.1供试材料（黑体小3号，段前段后0.5行行距） 2.1.1小麦品种（黑体4号，段前段后0.5行行距） 矮早781、科十，由河南大学生物工程研究所提供……。 2.1.2植物病原真菌 小麦叶枯病原菌（Pyrenophora tritici）；小麦全蚀病原菌（Gaeumannomyces graminis var tritici）；（正文里的英文和数字采用Times New Roman，大小按具体要求而定，正文小4，表格中5号） 2.2方法 2.2.1小麦内生细菌的分离 （1）材料处理与细菌培养 ①将各地采集的健康小麦取其根部用自来水冲洗干净并凉干； …… 2.2.2小麦抗盐碱实验 （1）预实验的设置（四级标题，宋体四号加粗） ①小麦的催芽及浸种 a.催芽：挑选籽粒饱满的麦种用自来水冲洗除去杂质后浸入0.1………… 2.2.3拮抗试验 （1）拮抗菌的筛选 ①初筛：…… = 2 \* GB3 ②复筛：…… （2）拮抗系数的测定 真菌……养5天（如图2）。 213 2 1 3 3 1 2 2 注：1、PDA平板；2、病原真菌；3、内生细菌 注：1、PDA平板；2、病原真菌；3、内生细菌；（宋小5） 图 1 示平板法拮抗菌筛选试验 图 2 示平板法测定拮抗系数（楷体5号） 3 结果与分析 3.1小麦内生细菌的分离 3.1.1培养基的选择 比较经表面消毒小麦……测观察，根据所分离的内生菌的大小、形状、颜色的不同共分离出222种小麦根部内生细菌。 3.1.2表面消毒对照 小麦根表……麦其根部内生细菌的种类较多，而处于拔节期的分离出内生细菌的数量较少。 3.2盐碱实验 3.2.1供试小麦品种的选择 用科十和矮早781两个小麦品种同时进行催芽，24小时后观察结果表明矮早781无论在出芽率还是在芽的长势上都比科十要好，即选用矮早781品种做供试小麦。 3.2.2预实验结果 一周后把盐、碱各……MC处理的小麦在根数、……变化趋势一致。 3.2.3盐碱实验结果 将放入25℃恒温光照培养的小麦取出洗去沙子，通过测量小麦的根长、地上部分长度、根（1cm以上）的总数和称量小麦的质量等指标对其进行统计，统计分析结果如下： 图 3 内生细菌对健康自然生长小麦生长量（质量）作用（楷体5号） 3.3拮抗实验 3.3.1拮抗菌的筛选 通过平板对峙法从分离到的内生……作用。如图10(B)示： AB A B A：对峙法测拮抗系数 B：拮抗菌筛选（宋体小5） 图9 拮抗菌的筛选及拮抗系数的测定（楷体5） 3.3.2拮抗系数的测定 分别测量真菌受抑制侧宽度（a）和对照侧宽度(b)如上页图7(A)，拮抗系数=(b-a)/b测量结果如下表： 表1拮抗细菌与病原真菌平板对峙试验中对应拮抗系数（楷体5号） 内生细菌 抑菌率(拮抗系数)（宋体5号） 小麦叶枯菌 西瓜枯萎病菌 小麦全蚀菌 玉米弯孢菌 WN-1-5 0.74 0.52 0.72 0.62 WK-4-34 0.75 — 0.83 0.54 WK-6-21 — 0.54 0.70 0.