制药092第二组幻灯片.pptVIP

西瓜细胞核雄性不育系雄花蕾的mRNA 差异表达分析 生物技术093第二小组 前言 植物花粉发育的分子生物学，已经成为植物分子生物学研究中的热点领域。在花粉的发育过程中，涉及近万种特异基因的表达，但目前已鉴定的花粉发育特异基因不过几十种[1]。因此，研究花药、花粉在发育过程中基因表达的时空特异性，分离相关特异基因和特异启动子，对于认识植物花粉发育的分子机理具有重要意义。 Liang 等[2]在1992 年首先建立的mRNA 差异显示技术，为研究基因表达调控提供了一种简便有效的方法。这种方法克服了以往鉴别基因差异表达方法如减法杂交和差异杂交等存在的实验周期长、操作复杂、效率低、费用高等缺点，被各国学者广泛采用并不断改进，应用于与生物发育密切相关的许多领域。 本实验室在对西瓜G17AB 细胞核雄性不育两用系的细胞形态、生理生化和分子标记研究的基础上，采用mRNA 差异显示技术，对西瓜G17AB 细胞核雄性不育两用系的可育株与不育株雄花蕾发育过程中的基因表达差异进行研究，以期阐明西瓜细胞核雄性不育发生的分子机理。 1.材料和方法 1.1 材料 春季将西瓜G17AB 细胞核雄性不育两用系定植于日光温室内，雄花开放时鉴别可育株和不育株并挂牌编号，选取不育株和可育株各10 株，摘取全部雄花蕾及开放当天的雄花后按不育和可育混合。采集的样品经液氮处理后立即置于-7