酶工程实验物工程09ppt.ppt

本实验共有六个分实验 : 实验一 酵母蔗糖酶的纯化与纯度测定 实验二 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定纯度 实验三 酵母蔗糖酶的结晶（选做） 实验四 蔗糖酶酶学性质的研究 实验五 酵母蔗糖酶的固定化 实验六 酵母蔗糖酶活性功能基团的化学修饰 酵母中含有丰富的蔗糖酶(EC.3.2.1.26) 本实验以酵母为原料，通过破碎细胞、加热除杂蛋白、乙醇沉淀、离子交换柱层析等步骤，分离纯化酵母蔗糖酶，并用聚丙稀酰胺凝胶电泳对其纯度进行初步检验。 结合力的大小取决于彼此之间相反电荷基团的静电引力 静电引力大小与溶液的pH值有关，因pH值决定蛋白质的解离程度。 阳离子交换剂 样品溶液pH＜pI时，酶带正电荷； 阴离子交换剂 样品溶液pH＞pI时，酶带负电荷 一般样品溶液的pH与酶pI相差一个pH以上 样品溶液的pH与酶pI相差越大的，带电荷越多 通过逐渐增加洗脱液离子强度的梯度洗脱方式，可使结合在层析柱上的蛋白质按照结合力由小到大的顺序依次被洗出层析柱。 本实验中使用的DEAE-52是弱碱性的阴离子纤维素，其基本骨架是纤维素、活