環境微生物實驗.doc

簡單染色法及革蘭氏染色法 1.前言 簡單染色法:利用單一染料使微生物細胞著色之方法，單染法多應用觀察細菌基本外形，菌體排列狀態及菌體成分分析。 革蘭氏染色法:用一種以上染劑所使用的染色法來區分細胞間或細胞某部位的染色及鑑別菌體或菌體中的特殊部分 並有兩個目標 (1)微生物的分組分類，達成分類鑑定 (2)用於細胞構造上之觀察 微生物學上重要廣泛使用的鑑別染色法，方法簡單，判定容易。 目的 簡單染色法: 簡單染色法可應用在驗證細菌是否為活菌或死菌及所謂活體染色，其原理是利用中性染料的稀釋液，對細菌進行染色，當細菌失去活性成為死菌時，菌體會被染料所滲透而活細菌則不會。 革蘭氏染色: 革蘭氏染色原理主要是利用僅存革蘭氏陽性菌體的核醣核酸鎂鹽蛋白質醣類複合物與染劑間的作用，此複合物質會染劑中的結晶子集點分子形成一種無法被酒精及水所溶解的性質，保留複合物之生成。 2.步驟 簡單染色法: (1)先拿載玻片，並滴(一滴)菌液 (2)再拿另一載玻片以45度前後塗抹均勻 (3)以酒精燈來回烘乾播片上之菌液 (4)並以甲烯藍染色之30秒至1分鐘 (5)用清水反面滴除多餘染劑 (6)以稀水紙吸去玻片上之水分 (7)先以10*10之倍率找尋菌株 (8)再用10*40之最大倍率觀察並用來會出其形狀 革蘭氏染色: (1)先拿載玻片