有机化学家能用的最现代化和尖端的方法全部包括某种类型的层析法.ppt

选择溶剂系统，必须经过多次的尝试，不断改变溶剂极性，根据板层情况， 选择最佳的溶剂体系 一般来讲，提高溶剂极性，化合物爬的越高 （反之则相反). 溶剂 （展开剂） 烷烃 (己烷,石油醚) 甲苯 二氯甲烷,氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 醇 醋酸 极性 显色　 化合物有紫外，在紫外灯下用铅笔将产物色带划出。 化合物无紫外，柱层析或用玻璃刀将对照点划下，用相应的显色方法测出产物带后，根据Rf值确定产物带。 刮板与洗脱　 用刮刀将产物色带刮下后，研细。 洗脱剂一般不用甲醇、四氢呋喃、DMF和DMSO等极性大或沸点高的溶剂洗脱。 玻璃漏斗洗脱或柱层析洗脱 板上的化合物是一片 样品过载 或者是由于你的样品十分不纯 板上的化合物拖尾 样品有酸性或碱性基团 (胺或羧酸) 有时在PTLC板会有严重的拖尾。加入几滴氨水或TEA(胺) 或醋酸 (羧酸)     PTLC中的问题 尽快处理你的化合物,长时间与吸附剂接触会增加你的样品变坏的可能性 小心选择溶剂, 甲醇可能会溶剂硅胶板里的融解黏合剂及荧光物质, 选择氯仿，丙酮和乙醇会好一些; 如果可能的话，尽量选择低极性的溶剂 1g吸附剂需用大约5ml溶剂 柱层析有助于除去黏合剂和荧光物质 操作过程请注意 Thanks 柱的尺寸和吸附剂量 某些典型样品量适用的柱尺寸和吸附剂数量 样品量 吸附剂量 柱直径 柱高 0.01g 0.3g 3.5mm 30mm 0.1g 3g 7.5mm 60mm 1.00g 30g 16.0mm 130mm 10.00g 300.0g 35.0mm 280mm D 流速 溶剂流经柱子的速率对於决定一个分离能进行得多好也起着作用. 一般来说, 需待分离的化合物在柱上逗留愈久, 其在固定相和移动相之间的平衡愈广泛. 结果可以使较为相似的化合物得到分离. 然而如果流速过慢, 则混合物中各个物质到了溶剂中后其在溶剂中的扩散速率可能变得大於这些物质沿柱下行速率. 在这种情况下谱带变宽, 反而使分离效果变差. 事实上, 在溶剂极性相同的情况下, 溶剂的流速一般而言（HPLC，MPLC除外），流速均以越快越好，因为一般而言流动相流速与板高成反比，而板高越小越好，所以流动相流速越快越好。所以快速 流速 （加压）柱层析的效果比一般重力柱层析好。 装柱 柱层析法中最关键性的操作是装柱. 柱子在用吸附剂填充时必须装得非常均匀, 如果装得不整齐, 出现气泡, 缝隙等会明显影响分离效率. 主要存在两种情况: 一: 谱带的最前面的边缘或称前沿不水平, 如果两条谱带紧靠在一起而又无水平的谱带前沿, 那么要想收集每一条谱带而把另外一条谱带完全排除在外是不可能的! 造成这个问题的因素有两个: 1. 吸附剂填充料的顶面不呈水平. 2. 柱子未被夹持在两个平面中(即前-后, 左-右两个平面) 完全垂直的位置. 装柱 二: 谱带前沿的一部分从谱带的主体部分中间向前伸出, 此时发生的现象称为流动或称沟流. 造成这种现象的原因主要是吸附剂表面不平整或在填料中有任何不平整性或气泡.   装柱 A 湿法(浆液法) 即吸附剂以浆液状态被装入管内. 浆液是一种溶剂和一种不溶解的固体的混合物. 操作方法是将固体吸附剂慢慢加入盛有大量溶剂的容器中. 注意要严格遵守这种加料次序(加吸附剂至溶剂), 因为吸附剂在加入到溶剂中时会因溶剂化效应而放热. 若向吸附剂内加溶剂, 由於发热会使溶剂几乎与加入速率一样快地气化逸出, 使最终的混合物不均匀或结块. 因此通常的做法是将吸附剂加入溶剂中, 边加边旋摇, 使其形成一种稠厚但能流动的浆液. 浆液应不断旋摇直至已呈均匀状态且相对地不再含有空气泡为宜. 装柱 装柱时, 先向柱内充入溶剂至约半满, 然后开启活塞让溶剂慢慢流下, 借助旋摇动作使浆液混合, 然后慢慢倾入正在流出溶剂的柱子的顶部. 同时要不断轻轻