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植物组织培养 外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分组织或器官 1）外植体灭菌消毒（根尖、茎、芽、嫩叶、种子、花粉等） 2）用消毒过的器械将外植体置于培养皿上 3）切取所需的外植体 4）将外植体接种于培养容器的培养基上 整个试验在超净工作台上进行，保持无菌！ 外植体经过一段时间在培养基上生长后，会形成愈伤组织 * 细胞工程指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。细胞工程 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞整体水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念 分类 植物细胞工程 动物细胞工程 理论基础 细胞的全能性 主要技术 植物组织培养 植物体细胞杂交 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 胚胎移植 核移植 植物细胞工程技术 动物细胞工程技术 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 1、定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。 2、原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因，从理论上讲，生物体的每一个活细胞都应该具有全能性。 3、差异： （1） 受精卵的全能性最高 （2）植物细胞全能性 〉动物细胞全能性 3植物细胞的全能性 受精卵 生殖细胞 体细胞 ＞ ＞ 4.细胞表现出全能性的条件 离体状态 有一定营养物质、激素和其他外界条件 例一：非洲爪蟾实验 突变型蝌蚪肠上皮细胞野生型未受精卵细胞紫外线破坏细胞核取出细胞核无核的未受精卵（含有一个核仁）“重组细胞”囊胚囊胚蝌蚪 成蛙（细胞核含一个核仁）移入 发育 发育 发育 已经分化的动物细胞可以发育成为一个动物体 5.细胞表现出全能性的条件 离体状态 有一定营养物质、激素和其他外界条件 蜜蜂（2N32）减数分裂 卵细胞N16发育 雄蜂N16 卵细胞可以直接发育成为一个新个体 例二： （二） 植物组织培养 1、植物组织培养过程： 离体的植物器官、组织、细胞 愈伤组织 根芽 植物体 脱分化 再分化 脱分化由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。 再分化 脱分化产生的愈伤组织继续培养又可以重新分化成根或芽等器官，这一过程称为植物细胞的再分化。 通过细胞分裂，形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。 植物组织培养 细胞离体一定的营养物质激素其他外界条件 （适宜的温度、PH、光照、无菌 ）琼脂必要条件： 实例：非洲紫罗兰的组织培养 试管苗大规模培养 1、定义： 用两个来自不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，且把杂种细胞培育成新的植物体的方法。 2、优势：（与有性杂交方法比较） 打破了不同种生物间的生殖隔离限制，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。 植物体细胞杂交 1 1 2 3 4 5 植物体细胞杂交过程示意图 去壁 去壁 纤维素酶果胶酶 原生质体 植物细胞 原生质体融合 离心、振动、电刺激、 聚乙二醇 再生细胞壁 杂种细胞 去分化 愈伤组织 杂种植株 激素 筛选 等量 激素 再分化 植物体细胞杂交过程示意图 植物A细胞 植物B细胞 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 融合体 再生壁 杂种细胞 细胞分裂 愈伤组织 杂种植株 去壁的常用方法： 酶解法（纤维素酶、果胶酶等） 原生质体融合方法： 物理法：离心、振动、电刺激等 化学法：聚乙二醇（PEG） 植物体细胞杂交过程示意图 意义：克服远缘杂交不亲和的障碍、培育新品种 基本过程 ①获得原生质体 ②获得杂种细胞 ③获得杂种植株 细胞A 细胞B 原生质体A 原生质体B 融合原生质体 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 意义：克服远缘杂交不亲和的障碍、培育新品种 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 一、植物繁殖的新途径 1.微型繁殖1微型繁殖技术:快速繁殖优良品种的植物组织培养技术.2特点:保持优良品种的遗传特性;高效快速地实现种苗的大量繁殖.（3）实例：利用快速繁殖技术来培育兰花 2.作物脱毒1材料:无病毒的茎尖2脱毒苗:切取茎尖进行组织培养获得3优点：使作物不会或极少感染病毒 3.神奇的人工种子1特点:后代无性状分离不受气候,季节和地域限制2技术:植物组织培养.3结构:人工薄膜胚状体或不定芽或顶芽或腋芽. 人工种子 自然种子 胚 状 体 人工种皮 人工胚乳 胚 种皮 胚乳 二、作物新品种的培育 1.单倍体育种1方法: