组织学实验技术概述幻灯片.pptVIP

组织学实验技术概述一般光学显微镜技术（light microscope, LM） 石蜡切片、冷冻切片、涂片、舖片、磨片 一般光学显微镜技术最常用的是石蜡切片，HE染色切片的制作步骤：固定（fixation包埋 embedding切片 section染色（staining特殊光学显微镜技术 暗视野显微镜 偏光显微镜 倒置显微镜 相位差显微镜 荧光显微镜 激光共聚焦显微镜 荧光显微镜 激光扫描共聚焦显微镜laser scanning confocal microscope, LSCM 透射电镜TEM 扫描电镜SEM 过碘酸雪夫反应 PAS反应 脂类组织化学染色（苏丹III染色） 核酸分子原位杂交术 组织学实验技术的作用组织学实验技术是现代生物医学领域 诸多基础及前沿学科学习和研究的重 要技术支持。 学习组织学实验技术的注意事项 打好理论基础 注重实际操作 注意发现问题 客观评价结果* 组织学实验技术 对组织或细胞的形态结构、物质组成及机能特征等进行研究的各种方法。 主要的组织学实验法 1、光学显微镜技术light microscopy一般光镜；特殊光镜 2、电子显微镜技术：透射电镜transverse electron microscopy, TEM;扫描电镜scanning electron microscope, SEM 3、细胞化学和组织化学技术histochemistry 4、免疫组织（细胞）化学技术Immunocytochemistry 5、组织培养技术tissue culture 6、放射自显影术autoradiography 7、形态计量术（morphometry 8、核酸原位杂交技术（in situ hybridization苏木精（Hematoxylin）+ 伊红（Eosin）染色 碱性染料 将嗜碱性物质（本身酸性）染成紫蓝色 酸性染料 将嗜酸性物质（本身碱性）染成粉红色 细胞核中的DNA、RNA细胞质中的RNA 细胞质、膜性结构（线粒体、溶酶体、滑面内质网） HE染色： 电子显微镜（electron microscope, EM）技术透射电镜（transmission electron microscope,TEM:观察细胞内部结构扫描电镜（scanning electron microscope, SEM：观察组织或细胞表面的立体结构细胞化学和组织化学 如： 检测多糖：过碘酸雪夫反应periodic acidSchiff reaction：简称 PAS反应。 检测脂类 ：苏丹III染色法免疫细胞（组织）化学利用抗原（antigen, Ag），抗体（antibody）特异结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。 细胞培养cell culture及 组织培养tissue culture技术 是利用标记的特异性DNA、RNA或寡核苷酸探针检测细胞内某种基因片断的方法 *