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第三节 基因定位与连锁遗传图 一、 基因定位 二、 连锁遗传图 一、基因定位 ? ??? 基因在染色体上有一定的位置。确定基因在染色体上的位置就叫做基因定位(gene mapping)。 ??? ??? 1、基因位于哪一条染色体上??? ??? 2、基因在染色体上的位置??? ??? 3、与相邻基因之间的关系 ??? 确定基因的位置主要是确定基因之间的相对顺序和距离。基因之间的距离是用重组率来表示的。 (一) 两点测验 两点测验是基因定位的最基本的方法,它是通过一次杂交和一次测交来确定两对基因是否连锁以及它们之间的距离。前面所讲的测交法实际上就是两点测验法。但是,仅凭一次两点测验结果,不能确定两对基因在染色体上的顺序(即方向)。 假如要确定三对基因的位置,要做三个两点测验才能完成。设有A-a、B-b和C-c三对基因,其定位的具体步骤是: 1、通过一次杂交和一次测交,求出A-a和B-b之间的重组值,根据重组值确定它们是否连锁。 2、再通过一次杂交和一次测交,求出B-b和C-c之间的重组率,并根据重组率来确定它们是否连锁。 3、又通过同样的方法确定A-a和C-c是否连锁。 4、根据三个重组值的大小,确定这三对基因在染色体上的位置。 例:玉米籽粒颜色C-c (有色-无),饱满(Sh)对凹陷(sh)为显性,非糯性(Wx)对糯性(wx)为显性,为了明确这三对基因是否连锁,曾有人做过三个两点测验。 1 有色 饱满 × 无色 凹陷??? ??? CCShSh ccshsh??? ??? 有色 饱满 无色 凹陷??? ??? CcShsh × ccshsh 3.6% 2 饱满 糯性 x 凹陷 非糯??? ??? wxwxShSh WxWxshsh??? ??? WxwxShsh × wxwxshsh 20% 3 非糯 有色 x 糯性 无色??? ??? WxWxCC wxwxcc??? ??? WxwxCc × wxwxcc 23.6% 结果:1C-c和Sh-sh之间的重组值为3.6%??? ??? 2Wx-wx和Sh-sh 20%??? ??? 3Wx-wx和C-c 23.6%??? 这样,可以确定三个基因之间的顺序和距离如下图:??? ??? 20 3.6??? ??? wx ―――――――――Sh―――C 两点测验法有两大缺点: (1)工作量大。要给三个基因定位须做三次杂交和三次测交。??? (2)如果基因间距离较远,很可能发生双交换,而影响测定结果的精确性。 (二) 三点测验 三点测验是基因定位最常用的方法。通过一次杂交和一次测交,能同时确定三个非等位基因间的排列顺序和遗传距离,而且结果也比较精确。 仍以上述玉米的三对等位基因为例,介绍三点测验的具体步骤。??? 步骤:1杂交??? 2 测交 凹陷非糯性有色 × 饱满糯性无色??? shsh + + + + ↓ + +wxwx cc??? +Sh+Wx+c × shshwxwxcc ??? 测交后代Ft表现型 F1配子类型 粒数 交换类别 饱满、糯性、无色凹陷、非糯、有色饱满、非糯、无色凹陷、糯性、有色凹陷、非糯、无色饱满、糯性、有色饱满、非糯、有色凹陷、糯性、无色 + wx csh + ++ + csh wx +sh + c+ wx ++ + +sh wx c 2708253862660111311642 亲型} 单交换}单交换}双交换??? 总 数 6708 如何分析上述结果呢? 第一步:判断这三对基因是否连锁。若这三对基因不连锁,即独立遗传(分别位于非同源的三对染色体上),测交后代的八种表现型应该彼此相等,而现在的比例相差很远。 其次,若是两对基因位于同一对同源染色体上,另一对独立,应该每四种表现型的比例一样,总共有两类比例值。现在的结果也不是如此。试验结果是每两种表现型的比例一样,共有四类不同的比例值,这正是三对基因连锁在同一对同源染色体上的特征。 第二步:确定排列顺序 既然这三对基因是连锁的,在染色体上就有一个排列顺序的问题。首先在Ft群体中找出两种亲本表现型和两种双交换表现型。双交换的可能性肯定是最少的,而亲本型个体数应该最多。 基因间排列顺序确定 ??? 本例中无疑是 + wx c 和sh + + 为亲型??? + + + 和sh wx c 为双交换型??? 三对基因,有三种可能的排列方式:??? sh + + + sh + sh c +??? + wx c wx + c + + wx 只有第二种才能产生+++和wxshc两种双交换配子,其它两种都不可能。所以可以确定三个基因间的相对位置,是sh在wx和c之间。??? 用三点测验法确定三个基因在染色体上的顺
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