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谷胱甘肽代谢途径基因在工蜂行为发育过程中的表达分析 Glutathione metabolism pathway genes in the worker bee behavior expression analysis in the process of development 报告人: 导 师: 研究背景 目的及意义 实验方法 实验结果 讨论与结论 致谢 研究背景 尼帕病毒脑炎是一种高度烈性人畜共患传染病。 目前我国虽然没有该病爆发,但其已经对我国构成了严重威胁。 目的及意义 以大肠杆菌O BL21表达重组载体(pET-NiV G:NiV F重组载体),以IPTG作为诱导引物诱导目蛋白的表达,之后对目的蛋白(尼帕病毒粘附蛋白G和融合蛋白F) ,进行分离及纯化。 实验方法 pET-NiV G:NiV F重组载体转入感 受态工程菌BL21 目的基因的诱导表达 目的蛋白的提取 目的蛋白的鉴定 一 、 pET-NiV G:NiV F重组载体转入感 受态工程菌BL21 利用热击的方法使感受态的工程菌BL21 吸收pET联NiV G和NiV F重组载体 二、目的基因的诱导表达 分离纯培养含目的基因的菌落,大量扩增之后,以IPTG作为诱导物诱导大肠杆菌表达目的蛋白。 三、目的蛋白的提取 用超声处理法破碎细胞,并用尿素反复 溶解可溶性的杂质蛋白,以获取较纯净的目的蛋白,并在各个阶段提取纯化样品。 四、目的蛋白的鉴定 对蛋白样品进行SDS电泳和 Western-blot鉴定。 实验结果 一、诱导表达NiV F蛋白及纯化结果 目的蛋白表达并且通过处理后获取较纯净的蛋白 二、诱导表达NiV G蛋白及纯化结果 目的蛋白表达并且通过处理后获取较纯净的蛋白 实验讨论与结论 实验讨论:实验获取的目的蛋白依然含有较多的杂质,如果对纯化后的产物进行过柱处理,特异性的保留目的蛋白,可获取更为纯净的目的蛋白。 实验结论:本实验成功的获取了较纯净的目的蛋白,并可用于免疫动物,来制备高免血清。 致谢 感谢所有的老师、同学和亲人对我的帮助。
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