第四节 Ras-Raf-MAPK通路幻灯片.pptVIP

酶偶联受体介导的信号传递 （与G蛋白无关） ①受体Tyr激酶 (receptor tyrosine kinases，RTKs); ②结合Tyr激酶的受体 （酪氨酸蛋白激酶（TPK联系的受体）; ③受体鸟苷酸环化酶; ④受体Tyr磷酸（酯）酶; ⑤受体Ser／Thr激酶。 除②以外，余4种均兼有受体和酶两个功能。 第四节 Ras－Raf－MAPK通路 一、Ras－Raf－MAPK 途径 Ras通路： 催化型受体与配基结合后发生自身磷酸化，并通过中介分子－Grb2和SOS激活Ras蛋白。 GTP酶活化蛋白(GAP)增加Ras蛋白GTPase活性(负调节) 鸟苷酸释放蛋白GNRP(或GEF)促进Ras蛋白结合GTP，(激活)（为主要调节蛋白） Grb2（growth factor receptor binding protein2) （含1个SH2和2个SH3） SOS均有SH2和SH3结构域； 静息细胞中，Grb2的SH3（C端）与SOS（富含Pro）结合。 质膜受体被配体激活后，TPK活性使受体Tyr磷酸化，Grb2N端SH2结合其，吸引Grb2－SOS复合物向质膜靠近，SOS与Ras靠近，SOS的核苷酸转移酶活性，使得Ras－GDP转变为Ras－GTP，其活化Raf蛋白； 受体型RTK多途径作用 二、Ras－Raf－MAPK通路的调节 1.活化的PKA对此途径的负调节作用 Raf是PKA的天然底物，其Ser43被其磷酸化后，降低Raf与Ras－GTP结合的亲和力。 2.PKC激活此途径： T、B细胞中，活化PKC明显增加Ras－GTP水平，并激活Raf；成纤维细胞，佛波酯无此作用。（所以机制不明） * * （膜受体酪氨酸蛋白激酶信号传递途径） （细胞外信号） EGF、PDF等 具TPK活性的受体 GRB2 P SOS P ras-GTP P raf 调节其他蛋白活性 MAPKKK P MAPKK MAPK P P P 细胞核 反式作用因子 调控基因表达 细胞膜 二聚化 （SH2） （SH3） （Pro) Ras蛋白： 单链多肽，原癌基因ras编码，Mw21kd，作用类似于G蛋白，又名P21蛋白，小G蛋白 RasGTP-活性状态 RasGDP-无活性状态 本身无调节活性结构。 SOS：son of sevenless SOS SOS来历：果蝇复眼发育 含磷酸化tyr模体 PTB Protein tyrosine binding 磷脂衍生物 PK、细胞骨架调节分子等 PH Pleckstrin homology 富含pro模体 衔接蛋白、磷脂酶、pk SH3 Src homology 3 磷酸化Tyr模体 PK 、磷酸酶、衔接蛋白 SH2 Src homology 2 识别模体 存在分子类型 缩写 Pr相互作用结构域 Raf蛋白： 具有ser／Thr蛋白激酶活性，为下述系统激活因子 （c－Raf－1，B－Raf，A－Raf） 保守区域CR1：锌指结构 CR2：含可被磷酸化的Ser/Thr CR3：激酶结构域 Ras使Raf定位于质膜，激活Raf的激酶活性。 （Raf的Ser/Thr磷酸化，c－Raf－1需Tyr磷酸化） MAPK系统（mitogen-activated protein kinase)： 包括MAPK （MEK，细胞外信号调节激酶） 、 MAPK激酶（MAPKK）、MAPKK激酶（MAPKKK即Raf蛋白），是一组酶兼底物的蛋白分子。 MAPKK：双激酶，Ser/Thr及Tyr磷酸化 （细胞外信号） EGF、PDGF等 具TPK活性的受体 GRB2 P SOS P ras-GTP P raf 调节其他蛋白活性 MAPKKK P MAPKK MAPK P P P 细胞核 反式作用因子 调控基因表达 细胞膜 二聚化 （SH2） （SH3） （Pro) MAPK拥有5个成员的家族。目前认为起着重要作用 引发组装胞内信号复合物（暂时）将信号传递到细胞内部。 信号蛋白的不同组合形式，产生不同的细胞应答 PLCγ RTK膜受体 Grb2－P SOS－P Ras－GTP cAMP PKA PIP2 DAG IP3 PKC CAMK 修饰转录因子和调节因子