分子生物复习题(整理版)副本..docVIP

microRNA研究 1、比较miRNA和siRNA的异同。 miRNA siRNA 产生 细胞内RNA的固有（正常） 病毒感染和人工插入后诱导产生 来源 内源转录本 转基因或病毒RNA（外源） 互补性 不完全互补，存在错配现象 完全互补 途径 miRNA途径 RNAi途径 对RNA的影响 在RNA代谢的各个层面进行调控 降解靶mRNA 功能 调节内源基因的表达，在蛋白质合成水平发挥作用，与mRNA的稳定性无关 抑制转座子活性和病毒感染，在转录后水平发挥作用,影响mRNA的稳定性 相同：均为Dicer的产物，长度基本相同，均需Argonaute家族蛋白的存在，同为RISC的组分。 2、简述miRNA加工成熟的主要步骤。 据体内外实验研究表明miRNA的生成需要两个步骤： 细胞核中，基因组转录形成长链RNA分子pri-miRNA，pri-miRNA经双链RNA核酸酶Drosha酶作用生成70nt左右的pre-miRNA。 Pre-miRNA在Exportin5介导作用下转运出胞核至胞质中进行下一步加工。 2) 细胞质中，将pre-miRNA经双链RNA核酸酶Dicer酶作用加工为成熟的单链miRNA。 3、名词解释： microRNA：广泛存在于真核生物中的一组短小的、不编码蛋白质的RNA家族，表达具有组织特异性和阶段特异性。与靶mRNA结合，在转录后水平调控基因的表达，在胚胎发生、发育时序、器官分化、程序性细胞死亡和癌症等过程中发挥着重要作用 基因工程 名词解释: 1.基因工程（gene engineering）：在体外条件下，人工将DNA分子“剪切”并重新“拼接”，形成一个新的杂合的DNA分子，然后将它导入微生物或真核细胞中表达，产生人类所需要的基因产物或改造、创造新的生物类型的生物技术 2.载体（vector）：载体是供插入目的基因并将其导入宿主细胞内表达和复制的运载工具。一般为质粒，噬菌体或病毒，通常大多经过人工改造。为了便于获得阳性克隆，载体上常有筛选标记，如抗菌素的抗性，某些基因产物的显色反应等。 问答题: 1.基因工程的基本程序？ 目的基因的获得 目的基因与载体的连接 连接产物转化至宿主细胞 阳性重组体的扩增、筛选与鉴定 5. 目的基因在细胞中的表达 6. 表达产物的分离、鉴定等 总述 复习题: 1.简述mRNA、tRNA的功能. mRNA的功能：携带遗传密码，作为蛋白质生物合成的模板。把DNA所携带的遗传信息，按碱基互补配对原则，抄录并传送至核糖体，用以决定其合成蛋白质的氨基酸排列顺序。 tRNA的功能：活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。 2.核酸的变性、复性的概念. DNA变性(denaturation)：DNA二级结构和三级结构受到物理化学因素的破坏而解体，但其一级结构核苷酸间共价键并不断裂。DNA分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象。凡能破坏双螺旋稳定性的因素，如加热、极端的pH、有机试剂等，均可引起核酸分子变性。 复性 (renaturation)：变性DNA在适合的条件下，又可使两条彼此分开的链重新缔合，按原来的碱基对配对形成双螺旋结构的过程。 3.DNA复制的基本规律（50） 半保留复制：每个子代DNA双链都是由一条亲代和另一条新合成的核苷酸链组成。 DNA 新生链按5′→3′方向复制。 复制的半不连续性：一条新生链是连续复制，另一条新生链是不连续复制。 RNA引物引发复制：DNA 复制是由模板链特定序列上RNA 引物合成起始。 有复制起点、复制方向和复制子 6）DNA 复制具有高度忠实性。DNA 聚合酶的校正功能，错配修复系统，RNA引物作用。 4.名词： 端粒 （Telomere）：真核生物染色体末端由许多简单重复序列和相关蛋白质组成的复合结构，具有维持染色体结构完整性和解决其末端复制难题的作用。 端粒酶（Telomerase）：由蛋白质和RNA组成的一种逆转录酶，以自身RNA为模板，合成端粒重复序列，加到新合成DNA链末端。人体内端粒酶出现在大多数的胚胎组织、生殖细胞、炎性细胞、更新组织的增生细胞以及肿瘤细胞中。端粒酶活性的缺失将导致端粒缩短。 半保留复制：新合成的每个子代DNA双链都是由一条保留的亲代和另一条新合成的核苷酸链组成，称为半保留复制。 复制叉：DNA 开始复制时，亲本DNA 双链在复制起点处解开，DNA 分子上产生“Y”形连接区段，新生链在此合成，此部位称为复制叉。 基因（gene）：一段有功能的DNA片段，生物细胞中DNA分子的最小功能单位。 基因表达 1.基因转录的基本特征。 对于一个基因组（genome），转录只发生在一部分基因，而且每个基因的转录都受到相对独立的控制。 转录是不对称的，基因转录只能以双链