G+C 含量越高,解链温度就越高。 解链曲线的变化 三、变性的核酸可以复性或形成杂交双链 当变性条件缓慢地除去后,两条解离的互补链可重新配对,恢复原来的双螺旋结构,这一现象称为DNA复性(renaturation) 。 减色效应:DNA复性时,其溶液OD260降低。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,这一过程称为退火(annealing) 。 不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜的条件可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成,也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。 核酸分子杂交(hybridization) 核酸分子复性和杂交 研究DNA分子中某一种基因的位置。 监定两种核酸分子间的序列相似性。 检测靶基因在待检样品中存在与否。 核酸分子杂交的应用 第五节 核酸酶 Nuclease 依据底物不同分类 DNA酶(deoxyribonuclease, DNase): 专一降解DNA。 RNA酶 (ribonuclease, RNase): 专一降解RNA。 依据对底物作用方式不同 核酸内切酶:在DNA或RNA分子内部切断磷酸二酯键 。 核酸外切酶:水解核酸分子链末端的磷酸二酯键。 有
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