第二章 细菌的生理ch02课件.ppt

三、细菌的代谢 细菌与真核生物新陈代谢的主要区别：  第二节 细菌的生长繁殖 液体培养细菌的生长曲线 新繁殖的活菌数与死菌数大致平衡 ，营养的消 耗、代谢产物的蓄积等。 3、 温度 一般病原菌的最适温度与人畜的体温相近似。 4、渗透压 在适宜的渗透压下细菌才能生长。个别细菌（粪链球菌、葡萄球菌、盐杆菌）能在较高盐浓度下生长。 ?5、 气体 气体对细菌生长繁殖有影响，主要是O2和CO2 。 四、分裂方式 细菌以二等分裂进行繁殖。繁殖时菌体中部的细胞膜凹陷，形成隔膜，将一个菌体横分裂为2个大小不等的细菌，再从2个分裂分为4个……。 第三节 细菌的人工培养 一、培养基（culture medium） （一）按营养组成的差异分 1.基础培养基 : 基本营养成分 2.营养培养基 : 在基础培养基中添加一些其它营养物质，如葡萄 糖、血液、血清、生长因子等。 1.固体培养基 : 1.5%~2%琼脂，用于细菌分离纯化。 2.半固体培养基: 0.5%琼脂，作穿刺试验。 3.液体培养 : 扩增纯培养的菌体。 1.鉴别培养基:在培养基中加入特定底物，观察细菌在其生长后分解 底物如何，从而鉴别细菌。 2.选择培养基:在培养基中加入某种化学物质，使之抑制一类细菌 生长，而有利于另一类细菌生长，从而将后者选择出来。 3.厌氧培养基:专供厌氧菌的分离、培养和鉴别用. 将普通培养基放在 无氧环境中培养，或者使培养基本身成为无氧的环境。 细菌在血琼脂上的生长特性：α－　半透明带绿色 弱毒　β－　透明溶血环 强毒　γ－不溶血 非致病性 培养 分离好的平板做好标记，倒置于37℃温箱培养18～24h 。 接种好的斜面、液体、半固体培养基做好标记，放37℃温箱培养18～24h 。 2、细菌的生长表现 细菌具有分解某些糖类的特定酶，可根据细菌分解利用糖能力的差异，表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。 是否产酸，可在糖发酵培养基中加入指示剂溴甲酚紫（即B.C.P指示剂，其pH在5.2以下呈黄色，pH在6.8以上呈紫色），经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。是否产气，可在发酵培养基中放入倒置杜氏小管观察。 与对照管比较，若糖发酵管保持原有颜色，其反应结果为阴性，表明该菌不能利用该种糖，记录用“－”表示；如呈黄色，反应结果为阳性，表明该菌能分解该种糖产酸，记录用“＋”表示。 培养基中有气泡为阳性反应，表明该菌分解糖能产酸并产气，记录用“⊕”表示；没有气泡为阴性反应，记录用“－”表示。 2、甲基红试验（M.R.） 肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基pH值下降至pH4.5以下。 有机酸的产生可由加入的甲基红指示剂变色进行检验，甲基红变色范围为pH4.2（红）— pH6.3（黄），细菌分解葡萄糖产酸，使甲基红指示剂变红，将培养液由原来的橘黄色变为红色，则M.R.（+）反应。 M.R.试验结果观察 于M.R.培养液中，各加入2～3滴甲基红指示剂，注意沿管壁加入，仔细观察培养液上层，若培养液上层变成红色，即为阳性反应；若仍呈黄色，则为阴性反应，分别用“＋”或“－”表示。 3、V.P.试验 某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养液中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中氧气氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V.P.（+）反应。 V.P.试验结果观察 取V.P.试管，加入等量V.P.试剂，摇匀，以使空气中的氧溶入，静置于37℃恒温箱中保温15～30min后，若培养液呈红色，记录为V.P.试验阳性结果（用“＋”表示）； 若不呈红色，仍未为黄中带蓝色者记录为V.P.试验阴性结果（用“－”表示）。  4、吲哚试验 有些细菌含有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸生成吲哚(靛基质)。吲哚本身没有颜色，不能直接看见，但当加入对二甲基氨基苯甲醛试剂时，该试剂与吲哚作用，形成红色的玫瑰吲哚。 吲哚试验结果观察 在培养液中加入乙醚1～2ml，经充分振荡使吲哚萃取至乙醚中