基因工程的原理(第2课时)教师版1..docVIP

第一节 基因工程的原理（第2课时） 课前预习（10分钟）凡事预则立，不预则废。 一、教学目标 1．理解基因工程的基本步骤 2．知道目的基因获得的方法 3. 理解重组载体导入和筛选的方法 4、知道DNA分子杂交技术和抗原-抗体杂交在目的基因检测与鉴定中的应用 5、尝试DNA的提取与鉴定 德育目标：通过对书中插图等的观察，学会科学的观察方法，培养观察能力；通过对基因工程学习培养理解能力、思维能力、语言表达能力；体会生物科技发展对社会的影响。 自主学习 目的基因获得的方法有哪些？ 如何构建重组载体（基因表达载体）？ 将目的基因导入植物细胞、动物细胞、微生物细胞的方法有哪些？ 举例说明如何对导入了重组载体的细胞进行筛选？ 如何检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因？ 如何检测目的基因是否翻译成了蛋白质？ 课堂互动学习 情境导入 展示生物工程操作过程的动画 学导结合 活动1：探究获取目的基因的方法 1、什么是目的基因？用总分式概念图对获取目的基因的方法进行总结。 目的基因：主要是指编码蛋白质的结构基因。 目的基因的获取方法： 基因组文库 直接分离法 从基因文库中获取 鸟枪法 cDNA文库 人工合成法 反转录法 化学合成法 2、直接分离法获取目的基因有何优缺点？反转录法适于合成什么样的目的基因？用图示表示反转录法的操作步骤。 鸟枪法或从基因文库中获取目的基因的优点是操作简便，缺点是工作量大，具有一定的盲目性。反转录法主要用于分子质量较大而又不知其序列的基因。 ①目的基因转录成的mRNA 单链DNA双链DNA（目的基因） 3、化学合成法合成的目的基因的碱基对排列顺序是唯一的吗？用图示表示其步骤。 不是唯一的，因为同一种氨基酸对应多个密码子。 ②蛋白质中氨基酸的序列mRNA中的碱基序列DNA碱基序列目的基因目的基因 活动2：重组载体的构建 1、本步骤操作的目的是什么？将目的基因直接导入受体细胞不是更简便吗？如果这么做，结果会怎样？ 目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在；可以遗传给下一代；使目的基因能够表达和发挥作用。目的基因直接导入受体细胞无法整合到受体DNA上。 2、作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？用图示或文字表示出基因表达载体的组成。 不可以。因为目的基因在表达载体中得到表达并发挥作用，还需要有其他控制元件，如启动子、终止子和标记基因等。 目的基因： 基因表达 启动子：位于基因首端，RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动转录基因 载体的组成 终止子：位于基因尾端，使转录在所需要的地方停下来 标记基因：鉴别受体细胞中是否含有目的基因 以质粒为例简述构建重组载体的方法。 方法：同种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接。 目的基因与运载体结合（以质粒为运载体） 活动3：重组载体的导入和筛选 什么是转化？基因转化的方法有哪些？ （1）转化——目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。 （2）基因工程中常用的受体细胞有：大肠杆菌、枯草杆菌、土壤脓杆菌、酵母菌和动植物细胞 （3）将目的基因导入受体细胞的方法：根据受体和运载体的类型不同，所采用的导入方法也不同。目前常用的方法有：①将目的基因导入植物细胞——脓杆菌转化法，还有基因枪法和花粉管通道法。②将目的基因导入动物细胞——显微注射技术③将目的基因导入微生物细胞——Ca＋处理细胞法 如何检测转化后的细胞是否导入了重组载体？ 运载体中所携带的一些抗性基因（如氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因）及发光基因等，能控制一些特殊物质的合成，利用这些特殊物质可以筛选运载体或重组运载体，这些基因就叫做标记基因。 筛选含有运载体的受体细胞，其过程是在含有相应抗菌素的培养基上培养，只有获得运载体的受体细胞才能继续生长，这样便可筛选出含有运载体的受体细胞。 知识拓展： 导入植物细胞：农杆菌转化法（表达载体导入农杆菌，再让农杆菌感染植物细胞），基因枪法、花粉管通道法。 导入动物细胞：显微注射法（将基因表达载体提纯，用显微仪注射到受精卵中） 导入微生物细胞：Ca2＋处理受体细胞成为感受态细胞，再进行混合。 将目的基因导入受体细胞： 细菌 ↓氯化钙 细胞壁的通透性增大 ↓ 重组质粒进入受体细胞 ↓ 目的基因随受体细胞的繁殖而复制 探究4：目的基因的表达和鉴定 举例说明如何对转基因生物进行生物学功能鉴定？ 目的基因的检测和鉴定 ①检