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双向凝胶电泳缓冲剂对小麦蛋白的有效溶解性一.简介 二.常见缓冲液、缓冲试剂 三. 电泳方法 四.总结 一.简介植物组织是由多种具有不同性能的蛋白质组成的。不同种类的蛋白质经提取增溶后用双向凝胶电泳方法进行有效的蛋白分析是一个有挑战性的过程。可溶酸性蛋白的最适PH值是4-7.缓冲剂由尿素，硫脲和PH值固定的梯度缓冲剂组成。碱性蛋白的最适PH值为6-11。这两种缓冲剂产生的双向凝胶具有高分辨率，高品质和最大量的检测蛋白斑点。二. 2D凝胶电泳缓冲液和试剂 样本制备是2D凝胶电泳的关键步骤，且是实验成功的关键。 在样本制备程序设计过程中，多个因素都发挥了重要的作用。 缓冲剂包括： 样品重泡胀缓冲试剂 两性电解质载体 IPG胶条 电泳缓冲液和聚焦缓冲液2D凝胶电泳样品重泡胀缓冲液 2D凝胶电泳样品重泡胀缓冲液又称为样品缓冲液，可用于蛋白样本的变性和溶解及IPG胶条的重泡胀。 样本制备的第一步是选择或制备合适的样品重泡胀缓冲液。 由于蛋白质的种类繁多，因此没有一种通用的样品重泡胀缓冲液。 选择缓冲液时需要考虑的两个因素是起始材料和实验目的。 样品重泡胀缓冲液必须： 在IPG胶条重泡胀和IEF过程中保持蛋白质的溶液状态 不影响蛋白质的pI 缓冲液一般含有变性剂 (尿素或尿素/硫脲)、增溶剂 (非离子或两性离子去污剂和两性电解质) 及还原剂 (DTT)。 下页列