液相色谱仪期间核查作业指导书.docxVIP

1目的对高效液相色谱仪运行情况进行检查，保证其正常使用，确保检验数据准确可靠。2范围适用于本公司高效液相色谱仪在两次检定之间或修理后的运行检查。3职责3.1检测中心液相主要使用人负责液相色谱仪期间核查的准备工作、操作及记录。3.2检测中心设备管理员负责统筹安排及记录归档。4计量性能要求4.1 输液系统泵流动稳定性应符合表1的要求。表1 泵流量稳定性SR的指标要求泵流量设定值（mL/min）0.2~0.50.6~1.0大于1.0测量次数333流动相收集时间/min20~1010~55泵流量稳定性SR3%2%2%4.2 检测器 仪器的检测器的主要技术指标见表2。表2 液相色谱仪检测器的主要技术指标 检测器项目紫外-可见光检测器二极管阵列检测器荧光检测器示差折光率检测器基线噪声≤5×10-4AU≤5×10-4FU≤5×10-6RIU基线漂移≤5×10-4AU/30 min≤5×10-3FU/30min≤5×10-6RIU/30min注：①若仪器的输出信号用mV或V表示，注意查看仪器说明书或仪器标牌标明的其与AU（FU）的换算关系；若无特殊标明通常可按照1V=1AU（FU）进行换算。4.3 整机性能 仪器的整机性能用定性定量测量重复性表示，指标要求见表3。表3 液相色谱仪整机性能指标要求 检测器项目紫外-可见光检测器二极管阵列检测器荧光检测器示差折光率检测器定性重复性≤1.0%≤1.0%≤1.0%定量重复性≤3.0%≤3.0%≤3.0%5 通用技术要求5.1 仪器外观 仪器上应有仪器名称、型号、制造厂名、产品系列号、出产日期等内容的标牌，国产仪器应有制造计量器具许可证标志。5.2 仪器电路系统仪器电源线、信号线等插接紧密，各开关、旋钮、按键功能正常，指示灯灵敏，显示器清晰。6 计量器具控制计量器具控制包括：两次检定之间或大修（修理更换泵、光路等）后的运行检查。6.1 核查条件6.1.1 环境条件6.1.1.1 核查室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，通风良好。6.1.1.2 室温（15—30）℃，检定过程中温度变化不超过3℃（对示差折光率检测器，室温变化不超过2℃），室内相对湿度20%—85%。6.1.1.3 仪器应平稳的放在工作台上，周围无强烈机械振动和电磁干扰源，仪器接地良好。6.1.1.4 电源电压为（220±22）V，频率为（50±0.5）Hz。6.1.2 核查设备6.1.2.1 秒表：最小分度值不大于0.1s。6.1.2.2 分析天平：最大称量不小于100g，最小分度值不大于1mg。6.1.2.3 数字温度计：测量范围为（0—100）℃，最大允许误差为±0.3℃。以上器具需经计量检定合格。6.1.3 其他要求6.1.3.1 核查用试剂：色谱级甲醇，纯水，分析纯的丙酮和异丙醇，紫外分光光度计，萘-甲醇溶液1.00×10-4g/ml和1.00×10-7g/ml，甲醇中胆固醇溶液200μg/ml和500μg/ml和胆固醇等。6.1.3.2 注射器：10μL，50μL和10mL各一支。6.1.3.3 容量瓶：50mL，10个。6.2 核查方法6.2.1通用技术要求按5.1和5.2的要求，目视、手动检查。6.2.2 输液系统泵流量稳定性SR按表1的要求设定流量，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先称重过的洁净容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集表1规定时间流出的流动相，在分析天平称重，按公式（1）计算SR。每一设定流量，重复测量3次。Fmax-FminSR= ———————×100% (1)Fm式中：Fmax——同一设定流量3次测量值的最大值，mL/min;Fmin——同一设定流量3次测量值的最小值，mL/min。Fm=(W2-W1)/（ρt·t） (2)式中：Fm——流量实测值，ml/min；W2——容量瓶＋流动相的质量，g；W1——容量瓶的质量，g；ρt——实验温度下流动相的密度,g/cm3（不同温度下流动相的密度参见附录C）t——收集流动相的时间，min。6.2.3 紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器的性能基线噪声和基线漂移选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，紫外检测器的波长设定为254nm,检测灵敏度调到最灵敏档。开机预热，待仪器稳定后记录基线30min，选取基线中噪声最大峰-峰高对应的信号值，按公式（3）计算基线噪声，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示。基线漂移用30min内基线偏离起始点最大信号值（AU/30min）表示。 Nd= KB (3)式中：Nd——检测器基线噪声；K—— 衰减倍数；B——测得基线峰-峰高对应的信号值，AU。6.2.4荧光检测器性能基线漂移和基线噪声将仪器各部分连接好，选用C18色谱柱，以100