专题一1.1DNA重组技术的基本工具资料.pptVIP

载体应具备的四个条件 (1)能在宿主细胞内稳定保存并自我复制。 (2)有一个至多个限制酶切点，以便与外源基因连接 (3)具有某些标记基因，以便进行筛选 （4）结构简单,独立于细菌外的DNA 目前常用的两类运载体 1.细菌的质粒，它是细菌染色体DNA以外的小型环状DNA(一般有1-200kb，kb为千碱基对)，有的细菌只有一个，有的细菌有多个 2.噬菌体和某些病毒的DNA。以 质 粒 为 载 体 的 DNA克 隆 过 程 小结 基因工程 的工具 限制酶 主要存在于原核生物中 具有专一性(识别序列) 切开DNA分子的磷酸二酯键 DNA连 接酶 连接磷酸二酯键 种类 E.coliDNA连接酶 T4 DNA连接酶 运载 工具 具备的 条件 结构简单,大小适中 能在宿主细胞中自 我复制并稳定存在 具一个至多个限制酶切位点 具标记基因 质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒 1.以下说法正确的是（） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、DNA连接酶使黏性末段的碱基之间形成氢键 C 练习 2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制B、有多个限制酶切点C、具有标记基因 D、它是环状DNA D * * * * * 选修3核心知识关系 生态工程原理 生态工程实例 生态工程 生态工程建设 基因工程 的诞生 蛋白质工程 基因工程应用 基因工程的原理及技术 基因工程 现代生物科技专题 植物的组织培养 动物细胞培养 体细胞克隆 细胞融合与单克隆抗体 细胞工程 转基因生物 的安全性 生物技术中的伦理问题 生物武器对人类的威胁 胚胎工程应用 胚胎工程理论基础 动物胚胎发育 胚胎干细胞移植 胚胎工程 转基因抗虫棉 抗虫棉 普通棉 棉花棉铃虫属鳞翅目，夜蛾科。为害棉花时，幼虫食害嫩叶成缺刻或孔洞；为害棉蕾后苞叶张开变黄，蕾的下部有蛀孔，蕾苞叶张开变成黄褐色，2—3天后即脱落。1只幼虫常为害十多个蕾铃，严重的蕾铃脱落一半以上。 1.1DNA重组技术的基本工具 基因工程的概念基因工程又叫做或。通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种提取出来，加以，然后放到另一种生物的细胞里，改造生物的遗传性状。 基因拼接技术 DNA重组技术 基因 修饰改造 定向地 基因工程名称 基因拼接技术或DNA重组技术 实质:基因重组 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA分子水平 基本过程 “剪切”“拼接”“导入”“表达” 结果 人类需要的基因产物 基因工程的概念 这种技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切” 和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。 基因工程培育抗虫棉的简要过程： 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？ 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 抗虫基因与运载体DNA连接 关键步骤三： 抗虫基因导入受体(棉花)细胞 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ 关键步骤一的工具： 关键步骤二的工具： 关键步骤三的工具： 基因的剪刀——限制酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运载工具——运载体 DNA 重组技术的基本工具 “分子手术刀” ──限制酶 “分子缝合针” ──DNA连接酶 “分子运输车”──基因进入受体细胞的载体 Hamilton O. Smith 1970年发现了限制性内切酶 Werner Arber Daniel Nathans与这两位分享了1978年诺贝尔医学和生理学奖 限制性内切酶及其缓冲液 识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 主要是从原核生物中分离纯化出来的一种酶。能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶。 4000种。 1、来源： 2、种类： 3、作用： 4、结果： 形成两种末端 一、 “分子手术刀” ——限制性核酸内切酶 黏性末端 平末端 T 磷酸二酯键 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 A大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 限制酶 什么叫黏性末端？ 限制酶 什么叫黏性末端？ 什么叫黏性末端？被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏