研究生仪器分析实验指导书-2015.docVIP

实验一 紫外光谱分析实验 一、实验目的要求 通过实验了解有机物吸收带精细结构及其在不同溶剂中精细结构的变化；利用紫外光谱法纯度检验；测量样品的浓度。 要求同学掌握紫外光谱仪的仪器基本构造及分析原理；利用所学过的紫外光谱知识，解释有机物在不同形态下的吸收带精细结构变化；样品纯度的检验，及可能含有的杂质是什么；设计出合理的方法测出样品的浓度。 二、实验原理 紫外吸收光谱法是有机分析中一种常用的方法，具有仪器设备简单、操作方便、灵敏度高的特点，已广泛应用于有机化合物的定性、定量和结构鉴定。 由于紫外吸收光谱的吸收峰通常很宽，峰的数目也很少，因此在结构分析方面不具有十分专一性。通常是根据最大吸收峰的位置及强度判断其共轭体系的类型及在结构相似的情况下，区分共轭方式不同的异构体。 1．化合物中微量杂质检查 利用紫外光谱法可以方便地检查出某些化合物中的微量杂质。例如，在环己烷中含有微量杂质苯，由于苯有一B吸收带，吸收波长在220~270nm范围，而环己烷在此处无明显吸收峰。因此，根据在220~270 nm处有苯的粗细结构吸收带，即可判断环己烷中是否有微量杂质苯存在。 2．未知样品的鉴定 用紫外光谱法鉴定未知样品时，若有标准样品，则把试样和标准样品用相同的溶剂，配制成相同浓度的溶液，分别测量吸收光谱，如果两者为同一化合物，则吸收光谱应完全一致。若无标准样品，可与文献上的标准谱图进行比较。 在实际测定中，我们还常常利用紫外吸收峰的波长和强度进行定性分析。例如，烟碱（尼古丁）在0.1N硫酸中最大吸收峰波长λmax为260纳米，百分吸光系数 =343。如果某化合物在相同条下测得的λmax和 与烟碱的数据一致，则该化合物结构与烟碱结构就基本相同。 3．定量分析 应用紫外光谱法进行定量分析的方法很多，如：a. 标准曲线法、b. 对照法、c. 吸光系数法、d. 混和物的定量、e. 双波长分光光度法。但最常用最简单的方法就是标准曲线法。根据光的吸收定率： A=εbc ε-吸光系数；b-吸收池液层厚度；c-溶液浓度 如果液层厚度保持不变，即b一定，入射光波长和其他条件也保持不变，则在一定浓度范围内，所测得的吸光度与待测物质的浓度成正比。配制一系列浓度的标准溶液，在λmax处分别测定吸光度。以标准溶液的浓度为横座标，相应的吸光度A为纵座标，绘出标准曲线。如果测出未知浓度样品的吸光度值，就可以从标准曲线中上查出样品的浓度。 4．有机化合物分子结构的推断 1）共轭体系的确定 通过测定有机化合物的紫外光谱，可以确定分子中有无共轭体系及共轭的程度。如果一种化合物在210nm以上无吸收，可以认为不含共轭体系。在210～250nm区域有较强吸收带，则可能有两个共轭双键。例如：1，3丁二烯的λmax为217nm，εmax为21.000。如果在260～350nm区域有强吸收带，表示有三至五个共轭双键。例如：葵五烯有五个共轭双键，其λmax为335nm，εmax为118.000。随着共轭体系的增加，最大吸收波长红移，吸收强度增大。 2）互变异构体的判别 某些有机化合物在溶液中存在互变异构体，利用它们紫外吸收光谱的特点，可以进行判别。例如，乙酰乙酸乙酯存在酮式和烯醇式两种异构体。 酮式异构体孤立羰基，不存在共轭体系，在近紫外区无强的吸收，只是在吸收波长272nm（εmax=16）处有弱吸收，由n→π*跃迁引起；烯醇式异构体具有共轭体系，故在近紫外有较强的吸收，吸收峰波长在243纳为（εmax=16.000）。 3）顺反异构体的判别 当有机化合物分子空间构型不同时，其紫外吸收光谱也不一样。通常反式异构体的吸收峰波长比顺式异构体的吸收峰波长要长，吸收强度要大。利用这种判别，可以鉴别顺反异构体。例如：1，2-二苯乙烯的顺反两种异构体 λmax 和εmax 不一样。 4）样品浓度与溶剂的选择 紫外光谱法所测定的样品通常是液态物质。由于吸光度和浓度之间的线性关系，即朗伯-比耳定律（A=εbc），只有在稀溶液下才成立。所以，对待测物质的浓度就要有所要求，一般用量：1cm池子，约3ml溶液，样品量0.1~100mg。另外，由于溶剂效应，即某些物质的紫外吸收光谱特性，与所采用溶剂的极性有密切的关系，溶剂的极性不同，同一化合物的紫外吸收光谱形状、吸收峰位置不一样。在测试前，要正确选择溶剂。即记录吸收波长时，应注明所用溶剂，在把一种未知物的吸收光谱与已知化合物吸收光谱进行比较时，要使用相同溶剂。 溶剂除了对吸收波长有影响外，还影响吸收强度和精细结构。例如B吸收带的精细结构在非极性溶剂中较清楚，但在极性溶剂中则较弱，有时消失而出现一个宽峰。苯酚的B吸收带就是这样一个例子。苯酚的精细结构在非极性溶剂庚烷中清晰可见，而在极性溶剂乙醇中则完全消失而呈现一宽峰。因