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第四部分 :浅尝现代生物技术 1.进行菊花的组织培养 2.尝试植物激素的应用 实验目的: 通过必修课的学习，我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种子来培育植物的方法呢？ 组织培养 营养繁殖 扦插 嫁接 压条 无性 繁殖 　　组织培养就是取一部分植物组织，如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等，在无菌条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基上，给予一定的温度和光照，使之产生愈伤组织，或进而生根发芽。 一、组织培养概述 1.概念 2、植物组织培养的原理是什么？ 植物细胞具有全能性，即生物体的细胞，具有使后代细胞形成完整个体的能力。 3.植物组织培养的基本过程: 植物组织培养过程示意图 2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的？ 没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。 4.植物组织培养条件 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。 生长素/细胞分裂素 高 利于根和愈伤组织形成 适中 有利于根芽的分化 低 有利于芽的形成 二、菊花的组织培养 (一)设备及用品 1. 100ml三角瓶或大口培养瓶 2. 镊子 3. 超净台 4. 灭菌锅 5.封口膜和橡皮圈 6. 有棉球的广口瓶 7. 酒精灯 8.三角漏斗 9.培养皿 (二)材料 1.MS培养基(用于配置发芽和生根培养基) 2.奈乙酸用少量0.1mol/LNaOH溶液溶解,苄基腺嘌呤用少量0.1mol/LHCL溶解 3.发芽培养基(灭菌) 4.生根培养基(灭菌) 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 生芽 栽 培 实验过程 移 栽 教材用的是无菌培养幼苗 生根 (三)步骤 1.取外植体 超净台上将无菌幼苗切段,每段至少1张叶片 2.生芽培养 生芽培养基中,放入1-3段切段(茎部插入培养基,盖上封口膜.日光灯下保持18~25℃的温度培养,每天光照不少于14.5h 3.生根培养 2~3周后,将丛状苗在无菌条件下转入生根培养基中,在上述条件下继续培养. 4.适应锻炼 将苗转移至草炭土或蛭石中,用玻璃罩或塑料布保持80％以上的湿度,2~3天后打开减低湿度进行锻炼,直到将罩全部打开处于自然湿度下为止 5.定植 将苗转移到土中培养 6.自然生长的茎进行组织培养方法: 70％乙醇中浸泡10分钟 5％次氯酸钠溶液中浸泡5min 5％次氯酸钠溶液中浸泡5min 超净台上用无菌水清洗 将茎移至生芽培养基中 1.广泛应用于果树和花卉的快速繁殖。 2.借助于组织培养生产人工种子（如图），解决某些作物品种繁殖力差、结子困难或发芽率低等问题。 3.生产药物、食品添加剂、香料、色素、和杀虫剂等。例如：紫杉醇，生物碱、紫草素等。 4.转基因植物的培育 5. 去病毒植株 6.花药离体培养 植物组织培养的应用 1、外植体带菌 2、培养基及接种器具灭菌不彻底 3、接种操作时带入 4、环境不清洁 污染途径 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、次氯酸钠） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ MS固体培养基成分及比例 为什么要配制培养基母液？ MS培养基含有十几多种化合物，配制不方便也难称量准确，可将培养基中的各种成分扩大一定倍数分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。 植物组织培养过程中，为什么用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素？ 答：植物中存在分解天然植物激素的酶，这样，天然激素在植物体内作用和存在的时间就较短。但植物中不存在分解人工合成激素的相应的酶，所以作用和存在的时间长，作用效果明显。 * *