实验四 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白课件.pptVIP

实验四 血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳 目的1、掌握电泳的基本原理 2、掌握电泳的基本操作 原理电泳:带电颗粒在电场中泳动的现象 　　各种蛋白质在同一pH条件下，因分子量和电荷数量等不同而在电场中的迁移率不同而得以分开。 不用支持物的 利用支持物 1）纸电泳 2) 淀粉凝胶电泳 3) 琼脂糖凝胶电泳 4）醋酸纤维薄膜电泳 5）聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） 泳动度U 泳动度：带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度 U=v/E=dl/Vt E:电场强度，每cm的电压降，V/l v:颗粒的移动速度，d/t d:颗粒的移动距离 t:通电时间 V:加在支持物两端的实际电压 l:支持物的有效长度 影响泳动速度的主要因素 1）电场强度：（越大，移动速度越快） 常压电泳：100-500V，2-10V/cm 高压电泳：500-10000V， 20-200V/cm 2）溶液的pH值：buffer。8.60 3）溶液的离子强度： （I越大，速度越慢；缓冲 效果越好） ，0.02-0.2之间。0.07 4）电渗现象：液体在电场中相对于固体支持物的相