第4次课蛙神经干动作电位的引导及其传导速度的测定..docVIP

第4次课 蛙神经干动作电位的引导及其传导速度的测定 一 实验目的 （一）、掌握蛙坐骨神经-胫腓神经标本的制备方法。 （二）、掌握引导神经干复合动作电位和测定其传导速度的基本原理和方法。 二 相关知识 （一）、兴奋及兴奋性的概念 （二）、动作电位的潜伏期、动作电位时程和幅值 1、 动作电位：各种可兴奋细胞在受到刺激而兴奋时，可以在细胞膜静息电位的基础上发生一次短暂的，可向周围扩布的电位波动。这种电位波动称为动作电位。 2、 刺激伪迹：刺激伪迹是在电刺激的同时，记录电极所记录到的一个电位变化。它在动作电位之前出现，而且会随着刺激强度的增加而增大。伪迹是由于刺激电流沿神经干表面的电解质液体传导到记录电极下而被引导、放大出来的电信号。由于电流的传导速度接近光速，所以刺激伪迹也几乎与刺激信号同时出现。伪迹可以作为刺激开始的时间标记，用来观察潜伏期的长短。 （三）、动作电位的传导 局部电流的形式 三 本次实验的特点 （一）、细胞外记录 （二）、神经干的动作电位 神经干是由许多粗细不等的有髓和无髓神经纤维组成的混合神经，故神经干动作电位与单根神经纤维的动作电位不同，它是由许多神经纤维的动作电位合成的一种复合电位。其传导速度与组成该神经干的主要神经纤维有关，蛙类坐骨神经干中以Aα类纤维为主,传导速度大约为35～40 m/s，它并不能代表组成该神经干的每一单个神经纤维的传导速度，而是主要代表了Aα类神经纤维的传导速度。神经干动作电位是由多根神经纤维的动作电位复合而成。对于每根神经纤维其兴奋性都不同，在一定范围内,较小的刺激能引起兴奋较高的少数神经纤维兴奋,所以动作电位的幅度较小;随着强度增加，能兴奋的神经纤维的数目也增加，所以神经干的复合动作电位增加，当所有神经纤维都兴奋后，动作电位的幅度就不会随着刺激强度的增加而增加速度。 四 本实验的原理 （一）、单根神经纤维动作电位的引导及其传导 1、记录出了一个先升后降的双相动作电位的原理 当神经纤维未受刺激时，膜外与电极所接触的两点之间没有电位差，所以两电极之间也无电位差存在，扫描线为一水平基线。在神经干左端给予电刺激后，则产生一个向右传导的冲动（负电位），当冲动传到1电极（负电极）下方时，此处电位较2处为低，产生了电位差，扫描线向上偏转，记录出一个向上的波形（在电生理实验中，为了便于观察，习惯上规定负波向上）。随后，冲动继续向右侧传导，离开1电极传向2电极处。当它到达2电极（正电极）下方时，因1电极处神经差不多已恢复到原来的状态，于是2电极处又较1电极处为负，引起扫描线向下偏转，记录出一个向下的波形。这样，在神经冲动向右传导的过程中，就记录出了一个先升后降的双相动作电位。 负电极在前时，它首先记录到神经干表面由正变负的电位变化，经历了由正到负再到正的过程，因此记录出动作电位的上相。当在后的正电极记录到这种同样的电位变化过程时，显示相反的情况，记录出动作电位的下相。如果互换正、负电极的位置，则记录到先降后升的双相动作电位。 2、双相动作电位的上、下两相幅值是不同的原因 如果一对引导电极的正、负极比较靠近，其双相动作电位的上、下两相幅值是不同的。因为前一个电极引导出来的动作电位要受到后一个引导电极极性的影响，会产生一定的抵消作用。由于神经干动作电位是一种复合动作电位，如果不同部位的神经纤维粗细不同，则更会影响到动作电位的幅值。但如果一对引导电极的正、负极相距较远，排除神经纤维粗细不同的影响，其动作电位的上、下两相幅值是相互不受影响的，也就是说应该是相同的。 A.??双向动作电位由A、B两点的单向动作电位叠加而成，但神经干单向动作电位是一非左右对称图形。因此，两图形叠加所形成的双向动作电位也不对称。特点：第一相高，第二相低，第一相窄，第二相宽。（如图所示）B.??当A点兴奋时，B点尚未兴奋（-70mv-0），但由于记录电极之间的距离不够大，当B点兴奋时，A点的兴奋还没有完全恢复（20mv-70mv），因此第一相高于第二相。C.?? A点神经纤维多于B点（次要原因）。 （二）、神经干动作电位的引导及其传导 五 实验步骤 （一）、制备蛙类坐骨神经-胫腓神经标本 通过观看录象让学生学习制作方法 （二）、连接实验装置 注意电极的安装，正负不要接反。 （三）、实验参数设置：参照P78表6-1设置 （四）、实验观察、记录和测量 启动刺激器，逐渐增大刺激强度，确定阈刺激（阈强度）和最大刺激强度。 调节刺激强度至图形最佳并记录双相动作电位。 将通道1的引导电极的正、负极互换，观察波形的变化。 夹伤1和2之间，记录单相动作电位 5、实验观察的指标参照P79表6-2的项目。 六 实验后处理 （一）、打印出双相和单相动作电位的图谱 （二）、列表6-2显示实验结果相关数值 七 注意事项 （一）、备的标本尽可能长些，避免损伤。