TAT-ODD介导的p53融合蛋白的靶向抗肿瘤作用的研究.docVIP

中国人民解放军军事医学科学院 博士学位论文 TAT--ODD介导的p53融合蛋白的靶向抗肿瘤作用的研究 姓名：赵宇 申请学位级别：博士 专业：药理学 指导教师：孙曼霁；王玉霞  ? 肿瘤细胞???? 关。??家族包括三个主要成员???，???和???，其中???的结构和功 ???，??，在常氧条件下，氧依赖性???多 ??腔?銸?核心脯氨酸????， ?失活，???伍亚基可以稳定存在，其可以 胞更能适应缺氧环境，具有更高的恶性表型，更易发生转移和侵袭。 蛋白转导结构域?????????????，??是一类可以将外源性生物  免疫荧光染色和???????的方法检测了融合蛋白在体外和体内的跨膜转运 功能和缺氧靶向稳定性；利用??旧ǚǎ珹??? 式细胞仪分析，测定了耵????蛋白在不同氧分压下对肿瘤细胞生长的抑 制活性和诱导细胞凋亡作用；通过?单染色细胞流式分析测定了其在常氧和缺氧 条件下诱导肿瘤细胞发生周期抑制的作用；通过??? ??．?在细胞水平检测 们利用裸鼠建立了小鼠人源肿瘤荷瘤荷瘤模型，通过腹腔连续给药的方式，测定 节，对其在体内发挥抗肿瘤活性的调节通路进行了研究。 过包涵体变性复性，并结合亲和层析法成功的得到了大量的高纯度的目的蛋白： 的进入肿瘤细胞；与在常氧细胞内相比，?阳???在缺氧细胞内的稳定性显  著提高，半衰期明显延长；??赴??ひ种剖笛橄允荆?毖跆跫?拢琖??巾? ????结果  墓塞擅噩 ?．???? ?? ??? ?????％??? ? ?? ?? ? ? ? ????“??? ???????産? ? ? ?? ???????琤? ??臼??? ??????? ????? ? ? ? ???? ? ?唱? ? ???頴????? ?? ?? ????． ????，?? ??????琸??觞 ????????? ?? ??????? ? ??????????? ? ??? ???????? ? ????? ???猘?豫????? ???弱? ? ?? ? ??? ????琲???? ??????????? ????哆????甎?? ????． ?????????? ????甌? ? ??? ????????鏽????嬲??????? ??? ? ? ? ????? ? ? ????? ?? ?? ??? ? ?璫? ?? ? ? ?? ??? ??觭?? ? ????? ? ???． ???? ?????? ??????， ?? ?  ?’? ? ???????????? ? ? ? ?? ? ? ??? ??????? ????????? ???加????，鲫? ?? ??瑂??，???? ???????．?? ? ? ??????．?’? ??? ? ??? ??? ?????? ?? ??鏽???? ??騬?? ? ?????????． ?? ? ??? ? ???．?? ?????????? ????瑃? ??? ?? ??? ? ??? ?????? ????? ?蓿琭，脱??巨；?????? ??? ????伽， ??????．??瓿鷖???? ??邪??? ??????，?????? ????? ??????????????昔禿 ??? ???? ???? ??? ?? ?眔???妙? ????了狮??? ????? ???猵? ????? ????． ? ? ?柚???? ??甧? ? ? ??? ????? ? ???鮡????? ?? ?????? ? ? ??? ?? ? ??， ?????? ?‘?篈?????甌? ?? ? ? ? ? ???哆? ?? ?? ??痵??????．??????? ???? ?彘??????謉 ? ? ?’，?珼．  ?? ?? ??? ??．?? ?? ????? ??? ?? ? ????? ?? ? ?? ? ????猵? ?? ? ????．??????? ? ???? ????猵? ?—???? ? ? ?? ??? ?琭?，??甇??? ? ? ? ?—?????????????? ?? ? ??????????；?甌? ??????? ?? ??????? ?? ?? ?? ?????? ?????? ?????，?颫??? ?? ?? ? ????? ? ? ??．???． ???，????琓?蒓?  缩略词表 英文全称 ? 吸光度‘ ???????????? ? 牛血清白蛋白 ?????? ??’·???????? ???????·??????? ?他??? ??? ??疉 乙二胺四乙酸 表皮生长因子 增强型绿色荧光蛋白 表皮