【世纪金榜】2016届高考生物二轮复习专题能力提升练19基因工程和细胞工程例析.doc

专题能力提升练 十九 基因工程和细胞工程 (45分钟·100分) 1.(12分下图是科学家利用小鼠成纤维细胞获得单克隆抗体的示意图。请据图回答 (1)获取转录因子基因需要的工具酶是　　　　　因成纤维细胞较小过程①将目的基因导入小鼠成纤维细胞时常用的载体是　　　　　。 过程②称为　　　　　在此过程中成纤维细胞在转录因子基因的作用下转化为胚性细胞在体外培养条件下胚性细胞能不断进行　　　　　。 过程③为动物细胞融合此过程常用　　　　　、灭活的病毒、电刺激等诱导细胞融合融合后的细胞具有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　的特性。 对杂种细胞进行　　　　　和　　　　　后才能筛选出能产生特异性抗体的杂种细胞。 【 【解析】(1)获取转录因子基因需要的工具酶是限制酶。因成纤维细胞体积较小，过程①将目的基因导入成纤维细胞时最常用的载体是动物病毒。(2)在体外培养条件下，iPS胚性细胞能不断进行细胞分裂。(3)动物细胞融合时，常用聚乙二醇、灭活的病毒、电刺激等进行诱导。融合后的Y细胞既能大量增殖，又能产生单一抗体。(4)杂交瘤细胞经过克隆化培养，并通过抗原-抗体杂交技术的检测，才可大量生产符合要求的单克隆抗体。 答案：(1)限制酶　动物病毒 (2)动物细胞培养　细胞增殖(细胞分裂) (3)聚乙二醇(PEG)　既能大量增殖，又能产生单一抗体 (4)克隆化培养　(抗原-)抗体检测 2.(14分芜湖三模下图是制备抗埃博拉病毒蛋白单克隆抗体的过程。请据图回答 (1)利用获取目的基因的过程中反应体系内要加入含有基因的、、酶和根据　　　　　　　　　　合成的引物且反应需要在一定的　　　　　溶液中才能进行。 选用Ⅰ和Ⅰ双酶切的优点是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　基因进入大肠杆菌细胞并在大肠杆菌内维持稳定和表达该过程可称为　　　　。 过程⑥常用的不同于植物原生质体融合的促融方法是用　　　　　处理。若把在选择培养基上存活的细胞全部培养在同一培养基中从中提取出的抗体　　　　　填“是”或“不是”单克隆抗体。图示过程应用的生物技术是　　　　　　　　　　　　　　　　。 答案：(1)目的基因的核苷酸序列　缓冲 (2)防止酶切产物之间的随意连接，提高连接成功率(其他合理答案也可)　转化 (3)灭活的病毒　不是　基因工程、动物细胞培养、动物细胞融合 【易错提醒】解答本题需注意两点： (1)没有注意到第(3)问中“不同于植物原生质体融合”的条件而错填为“聚乙二醇”，或者是只填“病毒”。采用灭活的病毒是动物细胞融合特有的促融手段。 (2)没有分清第一次还是第二次“筛选”而错填成“是”。单克隆抗体的制备至少经历两次“筛选”。 3.(10分福建高考是一种神经营养因子对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含基因的表达载体如图所示并导入大鼠神经干细胞中用于干细胞基因治疗的研究。请回答 (1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中使用胰蛋白酶的目的是　　　　　　。 构建含基因的表达载体时需选择图中的　　　　　　限制酶进行酶切。 经酶切后的载体和基因进行连接连接产物经筛选得到的载体主要有种单个载体自连、基因与载体正向连接、基因与载体反向连接如图所示。为鉴定这种连接方式选择酶和Ⅰ酶对筛选得到的载体进行双酶切并对酶切后的片段进行电泳分析结果如图所示。图中第　　　　　　泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。 将正向连接的表达载体导入神经干细胞后为了检测基因是否成功表达可用相应的　　　　　与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定密度时需进行　　　　　　培养以得到更多数量的细胞用于神经干细胞移植治疗实验。 【 (1)图示信息：限制酶的作用与目的基因和载体的关系、电泳结果与DNA片段的关系。 (2)隐含信息：动物细胞培养过程中原代培养与传代培养的特点。 【解析】(1)培养大鼠神经干细胞的过程属于动物细胞培养，在进行动物细胞培养和分离时，都要使用胰蛋白酶处理使细胞分散开。 (2)图1中构建含GDNF基因的表达载体过程中，获取目的基因(GDNF基因)使用的是XhoⅠ限制酶，故切割载体时应使用同种限制酶进行酶切。 (3)单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。选择HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对筛选的3种载体进行双酶切，对单个载体自连类型，只有HpaⅠ酶起作用，酶切后得到的就是一段6 000 bp的DNA片段，对应图2中的①；对GDNF基因与载体正向连接类型，HpaⅠ酶和BamHⅠ酶都起作用，酶切后得到一段6 000-100+100=6 000 bp的DNA片段和一段700-100+100=700 bp的DNA片段，对应图2中的②；对GDNF基因与载体反向连接类型，HpaⅠ酶和BamHⅠ酶都起作用，酶切后