091218植物病原细菌学实验例析.ppt

植物病原细菌学实验 二、实验内容和操作方法 实验二 植物病原细菌的分离 和致病性测定 二、实验内容和操作方法 实验三　植物病原细菌的形态观察? 二、实验内容和操作方法 实验五 植物病原细菌的PCR分子鉴定 ? 1、PCR反应： A. 取0.5ml 的eppendorf 管中依次加入效率试剂（共50?l）: 35?l H20 5?l 10X PCR反应缓冲液 4?l 25 mmol/L MgCl2 4?l 4种 dNTP 0.5?l 上游引物（引物1） 0.5?l 下游引物（引物2） 0.5?l 模板DNA(约1ng) 0.5ul Taq DNA聚合酶（约2.5单位） 混匀后离心5秒钟 B．混合物在94℃下加热5min 。 C．94 ℃变性30秒种，62℃退火1分钟，72℃延伸2分 钟，循环30轮，进行PCR。最后一轮循环结束后，于 72℃下保温10分钟，使反应产物扩增充分。 2、电泳：取10 ul