实验进展报告(三)5.08.docVIP

◇◆ 房明 ◆◇ 1、大孔树脂的预处理 大孔树脂AB-8,NKA-9,NKA-2（采购于南开大学化工厂）。 未经处理的大孔树脂常含有致孔剂、分散剂、交联剂、防腐剂、引发剂和一些未聚合的单体，使用前必须进行预处理，可以除去这些可能的有机残留物。吸附树脂通常以湿态保存，如果暴露在空气中，树脂可能部分干燥失水。为使树脂再度水合，应把脱水的吸附树脂放在乙醇或其他水溶性溶剂(如丙酮、甲醇)中充分浸泡，以便从孔中赶出气泡。因此先用蒸馏水洗三次，再用95%乙醇洗五次然后浸泡24小时使其充分溶胀，用95%乙醇洗至流出液加入三倍体积水不变浑浊为止，再用蒸馏水将树脂洗至无味，用4倍体积5%Hcl溶液浸泡3小时，用蒸馏水洗至中性，再用4倍体积2%NaoH溶液浸泡3小时，用蒸馏水洗至中性，用95%乙醇浸泡备用。 2、β-胡萝卜素提取液的制备 称取5g螺旋藻粉，用150ml丙酮:甲醇(6:4)的混合提取液在固液比为1:30(g:ml)，温度40摄氏度，提取时间50分钟条件下提取β-胡萝卜素。提取液离心后取200μl上清液于10ml容量瓶中用石油醚定容。以石油醚为空白，测定吸光度，计算提取液中的β-胡萝卜素浓度。 测定吸光度值为0.481，计算得提取液中β-胡萝卜素浓度为93.775μg/ml。 3、比较三种树脂的吸附率 称取经过预处理的三种树脂各5g，分别加入50mlβ-C提取液，在30℃（吕爽.胡萝卜中β-胡萝卜素的提取、纯化及其稳定性研究[D].陕西：陕西师范大学,2007.）下震荡吸附24h，过滤，然后分别取200μl虑液于10ml容量瓶中用石油醚定容，测定吸光度值，计算三种树脂吸附后溶液的β-C浓度。同时计算三种树脂的吸附量（μg/g）和吸附率。 吸附量公式如下： C0：吸附前母液浓度（μg/ml） C1：吸附后滤液浓度（μg/ml） V0: 吸附溶液体积(ml) w：树脂干重(g) 吸附率公式如下： C0：吸附前母液浓度（μg/ml） C1：吸附后滤液浓度（μg/ml） 计算结果如下： 树脂类型 C0 C1 V0 w 吸附量 吸附率 NKA-9 93.76 27.61 50 5 661.66 70.56% NKA-2 93.76 25.05 50 5 687.26 73.29% AB-8 93.76 27.81 50 5 659.69 70.35% ◇◆ 王子娜、周杏子、曾红胜、夏尔冬◆◇ 核桃发酵饮料试验计划（1） 1．测核桃粕的蛋白质含量（重点）和脂肪含量（已有数据，自己测一遍） 2．碱液去皮：在90~100℃，1%的NaOH溶液中烫漂2.5~3分钟后，立即冷却，用清水反复漂洗并手工去皮。 3．磨浆时温度对蛋白质溶出率的影响。（需要1的数据） 4．发酵饮料的各项指标（初步定，还要完善） 指标 项目 标准 感官指标 色泽（色） 根据以往文献制定感官评价标准 气味（香） 根据以往文献制定感官评价标准 口味（味） 根据以往文献制定感官评价标准 组织状态（形） 根据以往文献制定感官评价标准 理化指标 总固形物含量 无标准 蛋白质含量 无标准 脂肪含量 无标准 总糖量 无标准 酸度 无标准 PH值 无标准 离心沉淀率 无标准 乳酸菌群数 无标准 卫生指标 菌落总数数 ≤100cfu/ml 大肠菌群数 ≤3MPN/100ml 霉菌 ≤20cfu/ml 酵母菌 ≤20cfu/ml 致病菌数 不得检出 ◇◆ 郭瑶 ◆◇ 实验题目：螺旋藻的微波真空冷冻干燥实验 一、标准曲线法测定蛋白质含量实验 上学期在做测定总蛋白含量的预实验时，没有进行蛋白质标准曲线的测定，所以下个星期会先进行蛋白质的标准曲线测定。 方法一：以下是我通过查阅文献获得的考马斯亮蓝G-250染色比色法（Bradford法）测定蛋白质含量的方法： （1）原理 考马斯亮蓝G-250是一种有机染料，在游离状态下呈红色，在稀酸溶液中与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基结合后变为蓝色，其最大吸收峰的位置也由465nm变为595nm。蛋白质质量为1～1000μg，蛋白质-色素结合物在595nm波长下的吸收度与蛋白质含量呈正比，故可用蛋白质的定量测定。 （2）试剂 标准蛋白质溶液：称取10mg牛血清蛋白，用蒸馏水配成100μg/ml和1000μg/ml的标准溶液。 考马斯亮蓝G-250蛋白试剂：称取100mg考马斯亮蓝G-250，溶于50ml90%乙醇中，加入85%（质量浓度）的磷酸100ml，最后用蒸馏水定容到1000ml。此溶液在常温下可放置一个月。 （3）操作方法 Ⅰ.样品处理及制备 液体