高中生物：细胞工程复习纲要 人教版 选修3.docVIP

选修三 细胞工程复习纲要 植物的组织培养动物的细胞培养与体细胞克隆细胞融合与单克隆抗体植物的组织培养动物的细胞培养与体细胞克隆细胞融合与单克隆抗体 章前言——绪论 一、细胞工程的发展历程（了解、不用背） 一）植物细胞工程的发展历程 1、1902年德国科学家哈伯兰特提出细胞全能性理论。 2、1937年美国科学家用烟草茎段形成层作材料，在试管中培养出烟草植株。 3、1958年美国科学家斯图尔德用胡萝卜根的组织培养出胡萝卜。 4、1965年沃索用烟草单个细胞培养出植株。 5、1970年斯图尔德用悬浮的单个细胞培养出新植株。 6、20世纪70年代以植物细胞克隆为代表的细胞工程诞生；随后花药离体培养、原生质提培养、植物体细胞杂交技术就发展起来了。并进入告诉发展阶段。 二）动物细胞工程的发展历程 1、1907年美国生物学家哈里森成功在淋巴液中（体外）培养了神经细胞，证明了动物组织体外培养的可行性。 2、20世纪60年代我国科学家童第周成功进行了黑斑蛙红细胞细胞核移植，并得到正常发育的蝌蚪。 3、1975年英国米尔斯坦和德国科勒创立了单克隆抗体技术。 4、1996年在英国第一例克隆羊诞生，表明动物细胞工程技术已经得到了巨大的发展。 二、细胞工程 1、原理和方法：细胞生物学和分子生物学 2、操作水平：细胞水平或细胞器水平 3、目的：按照人的意愿改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 4、种类：植物细胞工程和动物细胞工程 第 一 节 植物细胞工程 植物细胞工程技术包括植物组织培养和植物体细胞杂交技术。 一、细胞全能性 1、概念：生物体的细胞具有发育成一个完整个体的潜能。 2、原因：生物体内细胞都具有发育成某种生物全部遗传信息，或者说含有发育成某种生物全部基因（包括体细胞和生殖细胞）。 疑问：哺乳动物成熟的红细胞有没有全能性？ 3、在生物体内全能性为什么不表达？ 答：在生物体内基因只进行选择性表达。 4、细胞表达全能性的条件： ①处于离体状态；②要在一定的营养和激素、外界环境条件作用下。 5、全能性大小比较 ①受精卵 生殖细胞 体细胞；②植物细胞 动物细胞；③分化程度低的细胞 化分程度高的细胞。 二、植物组织培养 1、植物组织培养：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2、原理：植物细胞的全能性 3、过程： 1）基本过程： ①制备外植体 → ②接种 → ③脱分化 → ④再分化 或者 【外植体 愈伤组织 根、芽 植物体。】 2）具体过程（胡萝卜的组织培养为例） ①制备外植体【从植物体上取下部分组织块或者部分细胞】 A、洗净、削皮、切段 B、消毒【目的：防止杂菌污染，否则杂菌会与外植体竞争并产生毒素】 C、制备外植体：在无菌条件下从形成层处切取部分组织块【注意：形成层细胞、根尖及茎尖分生区分化程度比较低，全能性比较高】 ②接种【必须无菌操作，目的还是防止杂菌污染】 ③脱分化 A、脱分化条件：Ⅰ、避光【目的：有利于形成大量的愈伤组织】；Ⅱ、恒温；Ⅲ、外源激素诱导。 B、脱分化结果：形成大量的愈伤组织。 C、脱分化：高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程排列疏松、无规则的薄壁细胞愈伤组织继续培养，重新分化成根或芽等器官的过程繁殖后代整齐一致能保持原有品种的优良性状快速繁殖可获得无毒苗可进行工厂化生产培养基的成分：主要是矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素等受生长季节限制地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序植物细胞的全能性活力的原生质体原理：细胞增殖 过程： 基 本 过 程 ⑵ 具 体 过 程 ①取动物组织块（一般取自动物胚胎和幼龄动物；原因：这些部位的细胞分化程度低，分裂能力强。） ②把组织细胞分散成单个细胞。（原因：组织块细胞靠在一起，限制细胞的生长和增殖；目的：营养易供应，代谢废物易排出。） A、用剪刀剪碎；（目的： ） B、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶；（①目的：水解细胞间物质，使细胞分开；②不能用胃蛋白酶；原因：胃蛋白酶的最适PH值1.5——2.0，会杀死细胞；③细胞间物质主要是蛋白质；④控制水解时间，否则会破坏细胞。） ③用生理盐水 稀释 成细胞悬液 ④原代培养。【⑴细胞悬液中的细胞贴附到瓶壁上，成为细胞贴壁；要求瓶壁内表面光滑、无毒、易贴附；⑵细胞沿着瓶壁进行分裂（增殖）——即横向扩张；⑶沿着瓶壁增殖至细胞相互接触，细胞就会停止增殖，成为接触抑制。】第一次培养就是