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- 2016-12-21 发布于浙江
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第二章 发酵的流程菌种扩大培养 第四节 实例 一、谷氨酸发酵的菌种扩大培养 斜面菌种→一级种子培养→二级种子培养→发酵罐 1、斜面菌种的培养 菌种的斜面培养必须有利于菌种生长而不产酸,并要求斜面菌种绝对纯,不得混有任何杂菌和噬菌体,培养条件应有利于菌种繁殖,培养基以多含有机氮而不含或少含糖为原则。 (1)斜面培养基组成 葡萄糖 0.1%,蛋白胨 1.0%,牛肉膏 1.0%,氯化钠 0.5%,琼脂 2.0~2.5%,pH 7.0~7.2(传代和保藏斜面不加葡萄糖)。 (2)培养条件 33~34℃,培养18~24h。 2、一级种子培养 一级种子培养的目的在于大量繁殖活力强的菌体,培养基组成应以少含糖分,多含有机氮为主,培养条件从有利于长菌考虑。 (1)培养基组成 葡萄糖 2.5%,尿素 0.5%,硫酸镁 0.04%,磷酸氢二钾 0.1%,玉米浆 2.5~3.5%(按质增减),硫酸亚铁、硫酸锰各2ppm,pH7.0。 (2)培养条件 用1000mL三角瓶装入培养基200mI,灭菌后置于冲程7.6cm、频率96次/min的往复式摇床上振荡培养12h,培养温度33~34℃。 (3)一级种子质量要求 种龄:12h,pH值:6.4±0.1 光密度:净增OD值0.5以上 残糖:0.5%以下 无菌检查:(-) 噬菌体检查:(-) 镜检:菌体生长均匀、粗壮,排列整齐 革兰氏阳性反应。
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