李2014李第七章RNA加工剪接.ppt.pptVIP

hnRNA (heterogeneous nuclear RNA)：核不均一核RNA 高等真核生物中，如果细胞核基因与其产物间在长度上存在差异，则其初始转录产物称之为hnRNA。 hnRNP:核糖核蛋白颗粒 hnRNA的物理结构是核糖核蛋白颗粒(hnRNP)，颗粒中蛋白质包围着hnRNA，这种hnRNA和蛋白质组成的复合物称为hnRNP。 hnRNA、hnRNP 、snRNA sRNA (100-300 base, 0-106/cell): 1)snRNA: 细胞核中的小分子RNA称细胞核小RNA (small nuclear RNA) 2)scRNA: 细胞质中小分子RNA称细胞质小RNA (small cytoplasmic RNA)。 3)snoRNA: 在核仁中存在的一类小的RNA，称为核仁小RNA (small nucleolar RNA)。 三峡大学 李晓玲编写与制作 * 三峡大学 李晓玲编写与制作 * mRNA依赖于snRNA的拼接特征 内含子边界保守序列 剪接体 是mRNA依赖于snRNA的拼接 三峡大学 李晓玲编写与制作 * 内含子的末端按GU-AG规则定义 三峡大学 李晓玲编写与制作 * 三峡大学 李晓玲编写与制作 * 核基因剪接中两步转酯反应 剪接体（splicesome） 真核生物mRNA前体在剪接过程中组装形成的多组分复合物，主要由细胞核内小分子RNA（snRNA）和蛋白质因子组成，即剪接体是一种具有催化剪接反应的核糖核蛋白复合体。 剪接体=几种snRNP（细胞核中的小分子RNA以核蛋白颗粒的形式存在，称为snRNP）+大量的其它的蛋白质分子。 参与剪接过程的5个snRNP是U1，U2，U4，U5和U6，这是据所含有的snRNA而命名。 每个snRNP含有一个snRNA 和几种（少于20种）蛋白质， snRNP共含有约40种蛋白质分子。每个snRNP都含有一个由8种蛋白质组成的结构中心。 snRNP和其他一些辅助蛋白质共同构成了剪接体。 snRNA是GU-AG型内含子剪接所必需的 剪接反应经过几个互相独立的阶段，识别共有序列的各组分之间相互作用导致剪接体的形成 4.酶母tRNA的酶促剪接 tRNA的剪接需要内切酶及RNA连接酶活性。 外显子-内含子边界在内切酶作用下被切断，产生2’ ，3’ - 环磷酸基和5’-OH末端。环磷酸基可开环产生3’-OH和2’-磷酸基。5’-OH可以磷酸化。 内含子被释放后，两个tRNA半分子折叠成一个类似tRNA的结构，此结构具有3’-OH和一个5’-P。两者的连接反应由RNA连接酶完成。 三种类型内含子剪接反应主要按两次转酯作用进行 三峡大学 李晓玲编写与制作 * 5.选择性拼接 选择性拼接/可变剪接 可变剪接 (alternative splicing): 基本转录体通过选择使用外显子以不同方式加工，产生表达不同基因产物的相关成熟转录本的拼接方式。 三峡大学 李晓玲编写与制作 * 三峡大学 李晓玲编写与制作 * 6.3 RNA编辑 RNA编辑是一种较为独特的RNA加工方式，即转录后的mRNA在编码区发生碱基插入、删除或转换的现象，是在RNA分子上的一种修饰。 gRNA：在锥虫线粒体mRNA的研究中，发现有一类小分子RNA（约55-70核苷酸），可以按照G-U配对方式在前体mRNA上为插入或插入删除提供模板。这类RNA就被称作指导RNA（guide RNA,gRNA） 三峡大学 李晓玲编写与制作 * 三峡大学 李晓玲编写与制作 * RNA编辑的生物学意义 1.可以消除移码突变等基因突变的为害。 2.增加了基因产物的多样性，由同一基因转录产物经编辑可以表达出多种同源体蛋白质。 3.RNA编辑和生物发育与分化有关，是基因调控的一种重要方式。 4.还可能使基因产物获得新的结构和功能，有利于生物进化。 5.中心法则的修订 三峡大学 李晓玲编写与制作 * 【复习思考题】 1、名词解释：RNA的拼接；自我拼接；选择性拼接；snRNP; 拼接体；RNA的编辑；gRNA。 2、请简述mRNA5‘帽结构在真核基因表达中的意义;mRNA3‘端多聚A尾的作用。 3、请就真核基因各类内含子的剪接方式进行比较。 4、什么是RNA编辑?其生物学意义是什么？ 三峡大学 李晓玲编写与制作 * 最初的实验结果表明，蛋白质和M1RNA单独都没有酶活性，但二者混合在一起又可恢复活性。其它生物材料的实验结果表明M1RNA是RNA酶P活性所必须的。事实上，M1RNA的酶活性并不比RNA酶P的粗制品的活性低。原来认为蛋白质赋予酶的活性，RNA只起某种辅助作用(例如帮助蛋白质与其底物结合)，但现在发现这两种功能已经倒转