第四章 基因突变与DNA的损伤及课件.pptVIP

在DNA复制过程中，仍难免会存在少量未被校正的差错。此外，DNA还会受到各种物理和化学因素的损伤。这些差错和损伤如果不被修复，将会产生严重的细胞学后果 生物细胞中形成了多种多样的DNA修复系统 3、碱基类似物：结构与碱基相似，可改变碱基配对特性的正常碱基衍生物或人工合成的化合物。 如：5-溴尿嘧啶（与A或G配对）、 2-氨基嘌呤（与T或C配对） DNA损伤的后果：①点突变、②缺失、③插入、④倒位或转位、⑤双链断裂 对生物可能产生4种后果： ①致死性； ②丧失某些功能； ③改变基因型而不改变表现型； ④发生了有利于物种生存的结果，使生物进化。 第二节　DNA损伤的修复 DNA损伤的修复：是指DNA受到损伤后，细胞内发生的使DNA的化学组成和核苷酸序列重新恢复或使细胞对DNA损伤产生耐受的一系列反应。 DNA是细胞中唯一具修复系统的生物大分子。 一、直接修复 直接修复：指的是不需要移去任何碱基或核苷酸就可以将损伤逆转到正常状态的修复机制。 是生物体内最简单的修复方式，属于无差错直接修复。 （1）光修复或光复活： 光修复：利用可见光能量将DNA中的嘧啶二聚体通过光解作用恢复为单体，从而恢复DNA正常结构的DNA修复过程。 这是最早发现的DNA修复方式。DNA中的嘧啶二聚体可通过可见光(300～600nm)的光解作用而恢复为单体。 催化这一过程的酶为光复活酶或光裂合酶。 基本步骤如图所示： ①此酶能特异性识别紫外线造成的核酸链上相邻嘧啶共价结合的二聚体，并与其结合，这步反应不需要光； ②结合后如受300-600nm波长的光照射，则光复活酶就被激活，将二聚体分解为两个正常的嘧啶单体， ③然后酶从DNA链上释放，DNA恢复正常结构。 （2）断裂链的重接 DNA单链断裂是常见的损伤，其中一部分可仅由DNA连接酶参与而完全修复。此酶在各类生物各种细胞中都普遍存在，修复反应容易进行。但双链断裂缺几乎不能修复。 （3）直接插入嘌呤 DNA链上嘌呤的脱落造成无嘌呤位点，能被DNA嘌呤插入酶识别结合，在K+存在的条件下，催化游离嘌呤或脱氧嘌呤核苷插入生成糖苷键，且催化插入的碱基有高度专一性、与另一条链上的碱基严格配对，使DNA完全恢复。 （4）烷基的转移修复 在细胞中发现有一种O6甲基鸟嘌呤甲基转移酶，能直接将甲基从DNA链鸟嘌呤O6位上的甲基移到蛋白质的半胱氨酸残基上而修复损伤的DNA。这个酶的修复能力并不很强，但在低剂量烷化剂作用下能诱导出此酶的修复活性。 二、切除修复： 切除修复：指在一系列酶的作用下，将DNA分子中受损伤部分切除，然后以另一条完整的互补链为模板，重新合成切去的部分，使DNA恢复正常结构的过程。 修复的基本步骤： 识别——切除——修补——连接 修复过程中需要多种酶； 修复主要有两种方式：碱基切除修复和核苷酸切除修复。 基本步骤如图所示： ①首先由核酸酶识别DNA的损伤位点，在损伤部位的5’侧切开磷酸二酯键。 ②由5’—3’核酸外切酶将有损伤的DNA片段切除。 ③在DNA聚合酶的催化下，以完整的互补链为模板，按5’—3’方向DNA链，填补已切除的空隙。 ④由DNA连接酶将新合成的DNA片段与原来的DNA断链连接起来。 三、错配修复 错配修复：按模板的遗传信息来修复错配碱基的修复方式。 错配碱基的修复会使复制的保真性提高102～103倍。 现已在大肠杆菌、酵母和哺乳动物中发现了这一系统。 修复时首先要区别模板链和新合成的DNA链，这是通过碱基的甲基化来实现的。半甲基化DNA成为识别模板链和新合成链的基础。 错配修复发生在GATC的邻近处，故这种修复也称为甲基指导的错配修复。 错配修复机制目前还不完全清楚。所有错配都可由这一系统修复，但其中以G－T错配修复更为有效，C－C错配的修复为弱。 GATC sequences are targets for the Dam methylase after replication. During the period before this methylation occurs, the nonmethylated strand is the target for repair of mismatched bases. 四、复制后修复 在DNA损伤未被切除或修复的情况下使细胞恢复DNA复制，等到复制完成后再通过其他机理修复残留的损伤，这种修复方式称为复制后修复。 受损伤的DNA链复制时，产生的子代DNA在损伤的对应部位出现缺口。 完整的另一条母链DNA与有缺口的子链DNA进行重组交换，将母链DNA上相应的片段填补子链缺口处，而母链DNA出现缺口。 以另一条子链DNA为模板，经DNA聚合酶催化合成一新DNA片段填补母链DNA的缺口，最后由DNA连接酶连接，完成修补。 重组修